3 clase de problemas actividad enzimas 1

PROBLEMAS DE ACTIVIDAD ENZIMÁTICA.
Unidad Internacional= cantidad de enzima necesaria para transformar un micromol
de sustrato por minuto. 1 U= 1 µmol/min.
Actividad específica= AE= Unidades de enzima por mg prot. totales= U/mg.
Actividad total= AT= Unidades totales de enzima en el extracto= U.
Porcentaje de recuperación= (ATfinal/ATinicial) x 100.
Factor de purificación= AEfinal/AEinicial.Número de recambio=
(µmoles de sustrato/min)/µmoles de enzima x sitios activos= min-1.
1. Una reacción transcurre con una velocidad máxima de 5 mmoles de sustrato
transformado por minuto y litro de medio. Si el sustrato está en exceso: ¿Qué cantidad
se habrá transformado al cabo de 10 min de reacción si el recipiente contiene 20 litros
de medio?
Sol.: 1 mol
2. Una preparación enzimática tiene unaactividad específica de 74 U/mg de proteína y
contiene 21 mg de proteína/ml. Calcular la velocidad de reacción en una mezcla de
reacción estándar que contiene:
a) 5 µl de la preparación enzimática;
b) 25 µl de la preparación enzimática
c) 50 µl de la preparación enzimática.
Sol.: a) 7,77 µmoles/min; b) 38,85 µmoles/min; c) 77,7 µmoles/min
3. Una preparación enzimática tiene una actividad específica de42 U/mg de proteína y
contiene 12 mg de proteína/ml. Calcular la velocidad inicial máxima de la reacción en
una mezcla de reacción estándar que contiene:
a) 20 µl de la preparación enzimática.
b) 10 µl de la preparación enzimática.
c) 60 µl de la preparación enzimática.
Sol.: a) 10,08 µmoles/min; b) 5,04 µmoles/min y c) 30,24 µmoles/min.
4. Una disolución al 2% de sacarosa se digiere a pH 5 con 25µg de invertasa. La
velocidad inicial máxima de liberación de productos reductores fue de 29 mg/min.
Calcular la actividad específica de la preparación enzimática (expresada como
desaparición de sustrato). (Pm de sacarosa: 342,2; Pm de glucosa: 180).
Sol.: A.E.= 3388 U/mg de proteína.
5. Un extracto de bacterias contiene 24 mg de proteínas por mililitro. 20 µl de este
extracto en un volumenestándar de incubación de 0,1 ml catalizan la producción de 1,6
µmoles de producto en un minuto. Calcular:
a) La concentración del enzima en U/ml de extracto.
b) La actividad específica del enzima en el extracto.

c) La actividad total del enzima si tuviéramos 200 ml de extracto.
Sol.: a) 80 U/ml; b) 3,3 U/mg; c) 16000 U.
6. Un extracto enzimático crudo contiene 20 mg de proteína/ml. 10 µl de eseextracto
en un volumen de reacción de 0,5 ml catalizaron la producción de 3 µmoles de producto
en un minuto en condiciones óptimas de trabajo. Calcular:
a) La velocidad de reacción en µmoles/min/ml.
b) La concentración del enzima en U/ml de extracto.
c) La actividad específica del extracto.
d) La actividad total del extracto si tenemos 100 ml del mismo.
Sol.: a) 6 µmoles/min/ml; b) 300 U/ml; c) 15 U/mgprot; d) 30000U.
7. Un extracto de bacterias contiene 50 mg de proteínas por mililitro. 50 µl de este
extracto en un volumen estándar de incubación de 1 ml catalizan la producción de 3,8
µmoles de producto en un minuto. Calcular:
a) La concentración del enzima en U/ml de extracto.
b) La actividad específica del enzima en el extracto.
c) La actividad total del enzima si tuviéramos 200 ml deextracto.
Sol.: a) 76 U/ml; b) 1,52 U/mg de proteína; c) 15200 U.
8. Al hacer una purificación de una enzima el extracto crudo tiene una actividad total de
45 U y una actividad específica de 29 mU/mg. En el último paso de purificación se
obtuvo una actividad total de 19,8 U y una actividad específica de 780 mU/mg.
Calcular:
a) Cantidad de proteínas en mg en ambas fracciones.
b) Porcentaje derecuperación.
c) Factor de purificación.
Sol.: a) 1551,7 mg y 25,38 mg; b) 44,0%; c) 26,9 veces
9. Al hacer una purificación de una enzima el extracto crudo tiene una actividad total de
53,70 U y una actividad específica de 20 mU/mg. En el último paso de purificación se
obtuvo una actividad total de 24,16 U y una actividad específica de 604 mU/mg.
Calcular:
a) Cantidad de proteínas en mg en ambas...