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B0217506

O.F. Medio Basal de Hugh
& Leifson
Uso
Medio de cultivo utilizado en las pruebas bioquímicas de identificación bacteriana en base al metabolismo oxidativo-fermentativo de
las bacterias Gram negativas, a la movilidad y producción de gas.

FÓRMULA (en gramos por litro)Tripteína...................................................................................................................................... 2.0 .
Cloruro de sodio.......................................................................................................... 5.0.
Fosfato dipotásico...................................................................................................0.30.
Azul debromotimol...............................................................................................0.03.

Fundamento
El medio basal O.F. fue desarrollado por Hugh y Leifson para evidenciar la importancia del significado taxonómico del metabolismo
oxidativo-fermentativo de los hidratos de carbono por las bacterias
Gram negativas.
Cuando un microorganismo es inoculado en 2 tubos del medio O.F.
conteniendo el mismo hidrato de carbono, y uno de los 2 tubos es
sellado con vaselina o parafinaantes de la incubación, se puede
diferenciar correctamente el metabolismo oxidativo o fermentativo
así como la no utilización de un hidrato de carbono por la bacteria
en estudio.
En el medio de cultivo, el agregado del hidrato de carbono en concentración al 1%, permite que los microorganismos utilicen para su
desarrollo dicha sustancia, evitando que bacterias aeróbicas metabolicen la tripteínapresente con la consecuente producción de
reacción alcalina, la que se neutraliza por la ligera acidez producida
por un microoganismo oxidativo.
El fosfato dipotásico agrega capacidad reguladora, el cloruro de
sodio mantiene el balance osmótico, y el azul de bromotimol es el
indicador de pH que vira al color amarillo en medio ácido luego de
la oxidación o fermentación del hidrato de carbono. Elcontenido
de agar otorga la propiedad de ser un medio semisólido y permite
determinar la movilidad y la distribución de los productos ácidos.
La glucosa es el hidrato de carbono mas frecuente que se agrega
al medio basal O.F., pero también pueden agregarse otros azúcares
(lactosa, sacarosa, maltosa, manitol o xilosa) según el metabolismo
del microorganismo en estudio.
Contenido y composición
CódigoB0217505: envase x 100 g.
Código B0217506: envase x 500 g.

Agar................................................................................................................................................2.50.
pH final: 7.1 ± 0.2

Instrucciones
Suspender 9.8 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Reposar
5 minutos. Calentar con agitación frecuente y hervir 1 minuto para
disolución total.Distribuir en recipientes apropiados y esterilizar en
autoclave a 121°C durante 15 minutos. Agregar de manera aséptica el hidrato de carbono en estudio en concentración final al 1%.
Distribuir en tubos estériles y dejar solidificar en posición vertical.

Nota: alternativamente agregar el hidrato de carbono previo a
la esterilización. En este caso se debe esterilizar en autoclave a
118°C durante 10minutos.
Características del producto
Medio de cultivo deshidratado: color beige verdoso, homogéneo,
libre deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color verde azulado.
Almacenamiento
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
Procedimiento
Siembra
Inocular, por cada hidrato de carbono que se use y para cada microorganismo en estudio, 2 tubos conteniendo el medioO.F. y el mismo
hidrato de carbono. Rotular un tubo con la inscripción: “Abierto” y
otro tubo con la inscripción: “Cerrado” (sellado).
A partir de un cultivo puro de 18-24 horas del microorganismo en

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estudio, preparar un inóculo poco denso y sembrar utilizando aguja
de inoculación. Picar hasta aproximadamente 0.6 mm del fondo.
Agregar al tubo...