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RECUENTO DE MICROORGANISMOS OSMOFÌLICOS
PNT-AL-022
Basado en el manual de la APHA
1. Definición:
Entre las distintas levaduras que resisten altas concentraciones de azúcar es necesario
diferenciarlas especies osmofílicas las cuales toleran y pueden desarrollarse en
alimentos con alto contenido de azúcar, de las osmodúricas que toleran los azúcares
pero no pueden multiplicarse. Este tipo delevaduras son responsables de muchas
alteraciones de productos con altas concentraciones de azúcar como salsas, jarabes,
conservas entre otros una de las levaduras que representa este grupo esSaccharomyces
rouxii (Zigosaccharomyces rouxii). Este recuento no se realiza en las industria de rutina,
sino cuando se encuentran alteraciones, especialmente en industrias de conservas.
2. Materiales
Pipetasestériles
6 cajas de petri estériles
3. Medios de cultivo
120 ml de Agar MY 40 (Extracto de levadura-Extracto de malta) Sacarosa 40%
4. Reactivos
Frasco de dilución con 90 mL de agua peptonada bufferada
2tubos de 16 x 150 mm tapa rosca con 9 mL de agua peptonada bufferada
5. Equipos
Balanza
Contador de colonias
Pipeteador
Incubadora a 30oC
6. Procedimiento
* Realice diluciones seriadas utilizando elprocedimiento descrito en el PNT-01
* Sembrar por duplicado, en profundidad, 1 mL de las diluciones seleccionadas.
* Agregar el Agar fundido MY-40 (15 – 20 mL) y enfriarlo.
* Mezclar según lasinstrucciones del PNT-01
* Una vez solidificado el Agar aplicar una capa sellante.
* Incubar a 30ºC por 5 días
* Seleccionar las cajas que estén entre 15 – 150 colonias, realizar el recuento y calcular
elresultado de levaduras osmófilas por g o mL.
NOTA. Cuando examine jarabes de glucosa, ajuste el contenido a 20oBrix antes de
procesar la muestra.
Como complemento a la técnica puede utilizar agar PDAacidificado e incube a 30oC
por 4 a 5 días.
7. Recuento.
Contar las colonias de cada placa a los 3, 4 y 5 días de incubación
8. Expresión de resultados
* Después de cinco días de incubación, retener...