Accion De Los Microorganismos

Acción De Los Microorganismos Sobre Diversos Sustratos

INTRODUCCION
Saber el comportamiento de los microorganismos sobre diversos sustratos desde un aislamiento bacteriano puede realizarse utilizando diferentes combinaciones de características y diferentes criterios en la evaluación de similitudes.
Los ensayos bioquímicos tradicionalmente utilizados llamadas pruebas bioquímicasconvencionales, generalmente determinan la actividad de una vía metabólica (conjunto de reacciones químicas) a partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer transforma o no.
Existen diferentes sistemas que facilitan la realización de tales ensayos, porque proponen el mejor conjunto de pruebas bioquímicas para la identificación de un grupo bacteriano, porquesimplifican la interpretación de un resultado utilizando un valor numérico, porque proveen los reactivos prontos para su uso o porque son totalmente automatizables.
 Las pruebas o ensayos bioquímicos, son pruebas simples que se han desarrollado para demostrar en forma clara una determinada característica bioquímica como presencia o ausencia de una determinada actividad enzimática, grupo de enzimas odeterminada vía metabólica, crecimiento a una determinada temperatura, crecimiento en presencia de inhibidores, etc. No significan de ninguna manera un estudio profundo del metabolismo bacteriano.
Para realizar las pruebas bioquímicas se dispone de múltiples medios, los cuales se deben aplicar de acuerdo a las exigencias del microorganismo en estudio.
Entre las pruebas que utilizamos en estapráctica fueron: Hidrólisis del almidón, fermentación de azucares, reacción de Vogues Proskauer, Formación del indol, Producción del hidrogeno sulfurado, Hidrólisis de la urea, asimilación del citrato.

I. DEGRADACION DE CARBOHIDRATOS
Las pruebas de hidrólisis y fermentación de carbohidratos son muy importantes para la identificación de las bacterias. Los medios, para estudiar la degradación deestos compuestos, se preparan por lo general añadiendo 0.5% del carbohidrato a un medio básico sin carbohidrato.
Algunas bacterias son capaces de usar moléculas complejas como fuentes de carbono, utilizan hidrolasas, que fragmentan sus moléculas y liberan otras más pequeñas, que pueden ser transportadas al interior de la célula bacteriana.
En términos generales, las hidrolasas son enzimasinducidas. Po lo tanto para estudiar la capacidad hidrolitica de determinada bacteria, es deseable cultivarla previamente en un medio cuya fuente de carbono sea únicamente la sustancia cuya hidrolasa se desea detectar, para que la bacteria induzca su síntesis.

a) HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN
El almidón es un homopolisacarido de la glucosa, cuyos componentes son la amilosa lineal y la amilopectinaramificada. Para utilizarlo, algunas bacterias sintetizan una exoenzima llamada amilasa que hidroliza los enlaces glucosidicos alfa1-4, liberan maltosa y isomaltosa, que ingresan a la célula y pueden metabolizarse.
Para evidenciar la presencia de amilasa, se recurre a que el almidón, forma un complejo de color azul intenso con el yodo. Las bacterias de la amilopectina dan solo un color café rojizo y elalmidón hidrolizado no dan ninguna coloración. Por lo tanto, la ausencia de color azul indica que el almidón ha sido hidrolizado.
La producción de amilasa es útil para diferenciar especies de bacillus, de streptococcus, y de lactobacillus. De igual forma se aplica a esquemas de diferenciación de algunas bacterias aerobias y anaerobias como Actinomyces bacteroides, clostridium y fusobacterium.MATERIALES
Primer periodo
* Cultivos de 18 a 24 horas de escherichia coli y de aeromonas hydrophila, cultivados en agar nutritivo con 0.2% de almidón.
* 1 placa petri con agar nutritivo con 0.2% de almidón.

Segundo periodo
* Botella gotero con solución de yodo al 1% en alcohol al 50%( también puede utilizarse yoduro acuoso de gran o solución de lugol).

METODOS
Primer...