Accion germicida de un producto comercial

Evaluación de la acción germicida en Sunfec a concentraciones de 2mL/1000 mL.

Metodología
El efecto germicida de las muestras fue evaluado siguiendo las especificaciones descritas en la NMX-BB-040-SCFI-1999.

Preparación del inoculo
La cepa (Listeria monocytogenes, Salmonella typhimurium, E. coli verotóxica,Candida albicans y Candida parapsilosis) previamente aislada e identificada, fuesembrada en Caldo Soya Tripticasa (CST) y se incubaron a 35°C durante 18-24 horas, los tubos fueron centrifugados a 3,500 rpm durante 10 minutos y se les realizo 3 lavados de células con 3 ml de Solución Salina Fisiológica (SSF) estéril en cada lavado.

Inoculación del Medio Agar Cuenta Estándar Especial (ACEE)
Utilizando la escala de McFarland, se utilizo el inoculo para preparar una solucióna concentración de 108 unidades formadoras de colonias (UFC) por cada mililitro o 0.5 McFarland, utilizando 1 mL del cepa se inocularon los frascos que contenían 99 mL de la muestra germicida. Posteriormente a las 6 y 26 horas, se tomó 1 mL de esta solución y se sembró mediante vaciado en placa y por duplicado en Agar cuenta estándar (ACEE) con neutralizante..
Las cajas se homogenizaronrealizando movimientos circulares, 6 en contra de las manecillas del reloj, 6 en dirección de las manecillas del reloj, 6 de arriba abajo y 6 de derecha a izquierda.
Una vez solidificadas se incubaron a 35°C durante 48 horas.
Para determinar el porcentaje de reducción se aplicó la siguiente ecuación propuesta en la NMX-BB-040-SCFI-1999.

En donde:
S= Células sobrevivientes UFC/ mL.
C.V.= Cuentaviable inicial
Para la cuenta viable la cepa problema utilizada (Listeria monocytogenes, Salmonella typhimurium, E. coli verotóxica,Candida albicans y Candida parapsilosis) fue inoculada en agar cuenta estándar especial (ACEE). Se realizaron diluciones decimales hasta 1:10000 para obtener una concentración de la cepa de 6.34 x 108 UFC/mL., 7.76 x 1010 UFC/mL, 3.9 x 108 UFC/mL, 5.15 x 107 UFC/mL y6.8 x 106 UFC/mL respectivamente.

Resultados
La cuenta viable inicial se realizo según lo especificado en la NMX-BB-040-SCFI-1999.
La cual nos dice que un producto etiquetado como germicida debe de tener un por ciento de la cuenta viable de 99.999% en 30 s de contacto a la concentración de uso recomendada, cuando la cuenta viable inicial se encuentre entre 75 y 125 x 108 UFC/mL

Cuentaviable inicial de Salmonella typhimurium
7.76 x 1010

Tabla 1. Efecto germicida de la Sunfec a una concentración de 2mL/ 1000 mL en un tiempo de contacto de 30 segundos.
Cuenta total de colonias de Salmonella typhimurium por vaciado en caja.
Medio ACEE
Cuanta total promedio UFC/mL
3.76x 107
%Reducción: 99.95








Tabla 2. Efecto germicida de Sunfec a una concentración de 2 mL/1000 mL en un tiempo de contacto de 60 Segundos.
Cuenta total de colonias de Salmonella typhimurium por vaciado en caja.
Medio ACEE
Cuanta total promedio UFC/mL
7.2 x 106
%Reducción: 99.99






Tabla 3. Efecto germicida de Sunfec a una concentración de 2 mL/ 1000 mL en un tiempo de contacto de 5 minutos
Cuenta total de colonias de Salmonella typhimurium por vaciado en caja.
Medio ACEECuanta total promedio UFC/mL
2.2 x 106
%Reducción: 99.997












Cuenta viable inicial de Listeria monocytogenes
6.3 x 108

Tabla 4. . Efecto germicida de Sunfec a una concentración de 2 mL/ 1000 mL en un tiempo de contacto de 30 segundos.
Cuenta total de colonias de Listeria monocytogenes por vaciado en caja.
Medio ACEE
Cuanta total promedio UFC/mL
4.7x 106%Reducción: 99.26





Tabla 5. Efecto germicida de Sunfec a una concentración de 2 mL/ 1000 mL en un tiempo de contacto de 60 segundos.
Cuenta total de colonias de Listeria monocytogenes por vaciado en caja.
Medio ACEE
Cuanta total promedio UFC/mL
2.86 x 106
%Reducción: 99.55




Tabla 6. Efecto germicida de Sunfec a una concentración de 2 mL/ 1000 mL en un tiempo de contacto de 5...