acidos nueclicos
UNIVERSIDAD MILITAR NUEVA GRANADA
FACULTAD DE CIENCIAS BÁSICAS
ENTREGA INFORME FRACCIONAMIENTO DE TEJIDOS (I)
ASIGNATURA BIOQUIMICA
BIOLOGIÁ APLICADA
1. Diana Sierra Vergara
1. Estudiante, Biología Aplicada, Universidad Militar Nueva Granada, 3 Semestre.
RESUMEN
Este informe de laboratorio abarcará el proceso mediante el cual se realiza la electroforesis de proteínas. Seutilizaron reactivos o disolventes orgánicos para visualizar las diferentes reacciones bioquímicas que ocurrieron en el desarrollo de la práctica de laboratorio, a partir de las muestras utilizadas en el laboratorio anterior correspondiente al fraccionamiento de tejidos (I). El desarrollo de la práctica de laboratorio se llevo a cabo en la sede de la Universidad Militar Nueva Granada Sede Campus Cajicáen el laboratorio de Bioquímica, ubicado en el edificio correspondiente a la Facultad de Ciencias Básicas.
PALABRAS CLAVES
Electroforesis, Proteínas, Reacciones, disolventes, Fraccionamiento de tejidos.
INTRODUCCIÓN
“La electroforesis de proteínas es un proceso mediante el cual se realiza una separación de las proteínas basadas en anteriores técnicas de fraccionamiento de tejidos. Seencuentran diferentes mecanismos de electroforesis que se diferencian en cuanto a la utilización de geles de poliacrilamida y agarosa que se utilizan para biomóleculas con mayor peso molecular como lo son los ácidos nucleicos y las proteínas” (Segal, 2005)1.
“Las proteínas son moléculas que son conocidas como una secuencia de aminoácidos, dentro de la manera como se puede encontrar una proteína a nivelestructural es a partir del plegamiento que presentan de manera que requieren una menor energía; generalmente presentan una cadena polipeptidica” (Alberts, et al. 2006).2
“La función de las proteínas y los ácidos nucleicos puede comprenderse mejor en función de sus estructuras, esto es de las relaciones tridimensionales de los átomos que las conforman. Las descripciones estructurales a nivel delas proteínas y los ácidos nucleicos hay determinación de 4 estructuras para las proteínas (primarias, secundarias, terciarias, cuaternarias) respectivamente”. (Voet, et al. 2006).3.
MATERIALES
Los materiales utilizados para el desarrollo de la práctica de laboratorio fueron:
Ribosa
Muestra M5 (Utilizada en el laboratorio anterior)
Solución de KOH 2N
Esferas de vidrio
Estufa
Beaker conagua
Tubos de ensayo
Gradilla
Solución de HCl 2N
Bencidina en Ácido acético al 4%
Pipetas
Pipeteador
METODOLOGÍA PARA ACIDOS NUCLEICOS
Se toma 1 ml de M5, añadiendo ml de KOH 2N (Tubo 1). Posteriormente, se coloca en baño María con una esfera de vidrio en su interior durante 30 minutos.
Se toma 1 ml de Ribosa, se añaden también 3 ml de KOH 2N (Tubo 2). Se coloca en baño María con unaesfera de vidrio en su interior durante 30 minutos.
A los tubos 1 y 2, se agrega 1 ml de HCl 2N.
Se realiza una centrifugación de 6000 rpm durante 10 minutos y observar sobrenadantes.
En otro tubo de ensayo (Tubo 3) se toman 0.5 ml de este sobrenadante y su precipitado que corresponden al tubo 1(Con muestra de M5), se agregan 0.5 ml de bencidina en ácido acético al 4%, se coloca nuevamente enBaño María con una esfera de vidrio en su interior durante 10 minutos y observar coloración.
Para la última parte se toman 0.5 ml del Tubo 2 (Ribosa), se agregan 0.5 ml de bencidina en acido acético al 4%, se lleva a Baño María con una esfera de vidrio en su interior durante 10 minutos y observar coloración.
RESULTADOS
La muestra M5 utilizada en el laboratorio anterior no presentó ningunacoloración.
La muestra de ribosa presentó una coloración final de rojo oscuro.
Al sobrenadante de ambos tubos de ensayo, se agrega la bencidina en acido acético al 4% de manera que se observa una coloración café oscura.
Posteriormente al colocar la solución anterior en el baño María se obtiene una coloración inicial amarillo claro, posteriormente, hay cambio de color a más oscuro, tomando...
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