Actividad De La Amilasa Salival

Informe N°5: ACTIVIDAD DE LA AMILASA SALIVAL

INTTRODUCION
PROPIEDADES DEL ALMIDON: El almidón es el polisacárido más abundante en vegetales y constituye la principal fuente de nutrición glicidica para la humanidad. Los almidones están constituidos por una mezcla de dos componentes: la amilosa y la amilopectina.
La amilosa se disuelve fácilmente en agua, adquiriendo una estructura secundariacaracterística, de forma helicoidal, en la que cada vuelta de hélice comprende seis unidades de glucosa. Esta estructura secundaria, en la que los grupos hidroxilo quedan hacia afuera, permite que el iodo penetre en el interior del helicoide, confiera a la disolución una coloración azul violácea intensa característica que permite la identificación positiva de trazas de almidón. Como estacoloración n o es resultado de ninguna interacción covalente, el calentamiento origina la desestabilización del helicoide y la perdida de color, que se recupera al enfriar lentamente la disolución. La variación de pH tiene un efecto análogo.
HIDROLISIS DE ALMIDON: E l almidón puede hidrolizarse por medios químicos o enzimáticos. La ebullición con ácidos o álcalis hidroliza aleatoriamente los enlacesglucosidicos entre unidades de glucosa, dando polisacáridos de longitud intermedia denominados dextrinas, cada vez menores hasta la obtención de unidades de glucosa individuales.
Los compuestos que se obtienen en la hidrolisis del almidón y el color que producen con el iodo son los siguientes:
* Almidón(azul)
* Amilodextrinas(violeta)
* Acrodextrinas(incoloro)
*Eritrodextrinas(rojo)
* Maltosa(incoloro)
* Glucosa(incoloro)
Tener en cuenta el color ligeramente amarillo propio del Lugol.

OBJETIVO

* Determinar si la amilasa influye en un almidón.
* Determinar a que temperatura actua la amilasa.

MATERIALES
* Amilasa
* Hcl
* NaOH
* Agua destilada
* Lugol

PROCEDIMIENTO
I. OBTENCION DE LA ENZIMA
1. Tras enjuagar la boca,se mastica un trozo de papel de filtro o de otro tipo para estimular la salivación. Colocar la saliva en un beaker, hasta recoger la cantidad suficiente de saliva para realizar la práctica..

2. La saliva así obtenida se diluye 1:10 con agua destilada, obteniendo así la preparación de enzimas base.
Es decir: 1 de la sustancia a diluir( saliva)
9 del diluyente ( agua destilada)

II. EFECTO DEL PH SOBRE LA AC TIVIDAD AMILASA SALIVAL
1. Tomar tres tubos de ensayo y añadir siguiendo el orden respectivamente:

Primertubo:
1ml de HCl 0.1N
1 ml de almidón al 2%
1 ml de saliva diluida 1:10

Segundo tubo:
1ml de NaOH 0.1N
1ml de almidón al 2%
1 ml de saliva diluida 1:10

Tercertubo:
1ml de agua destilada
1ml de almidón al 2%
A ml de saliva diluida1:10

2. Agitar bien y medir rápidamente el pH de cada tubo. Para medir el pH, se toma una gota de disolución con una varilla limpia y seca y se humedece con ella un trocito de papel indicador de pH, comparando el color obtenido con el de la escala.

3. Los tres tubos se colocan en un baño de agua a 37°C durante 15 minutos, se sacan los tubos y se efectúan las pruebas del iodo.III. INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA EN LA VELOCIDAD ENZIMATICA
1. Preparar 6 tubos: 3 de ellos con 2 ml de almidón al 2% y los otros 3 con 2 ml de amilasa salival diluida 1:10

2. Colocar dos tubos, uno conteniendo almidón y el otro amilasa salival, a cada una de las tres temperaturas siguientes( marcar cada pareja de tubos según la temperatura a la que se ensaya):
En baño hielo (0°C si seañade un poco de agua al hielo enfría mas)
A temperatura ambiente (20°C)
En baño maría a 37°C

3. Mantener así los tubos durante 15 minutos para que alcancen la temperatura del experimento.

4. Añadir al tubo que contiene al almidón el contenido del tubo que tiene la saliva, agitar bien y dejar que siga a su temperatura correspondiente. Empezar a contar el tiempo (los tubos...