Actividad enzimática

27 de mayo de 2013


ABSTRACT

























INTRODUCCIÓN
Con el fin de determinar la presencia de enzimas en células eucariotas y ver cómo influye el estado físico (entero o molido) en la actividad enzimática, se realizó el experimento de adicionar a muestras de papa e hígado peróxido dehidrogeno, y ver la reacción de estas en distintos medios de experimentación, entre los cuales se encuentra la trituración de dichas muestras, y el aumento de la temperatura por sobre los 50 ºC. Como punto de referencia, se encuentra que el peróxido de hidrogeno es producido por una serie de reacciones metabólicas en las células, pero dicho compuesto a su vez es dañino para su entorno y ellas mismas,es por ello que existen enzimas capaces de degradarlo en agua e hidrógeno, con el propósito de mantener la homeostasis celular.
Por otro lado, para saber si las enzimas son capaces de actuar a temperaturas extremas, se realizó el experimento de adicionar a muestras de amilasa salival un poco de sustrato, en este caso almidón, y someterlas a temperaturas óptimas y extremas, siendo elmétodo verificador de la reacción el lugol, como punto de referencia, se encuentra que la amilasa es una enzima que degrada carbohidratos como el almidón y que su efectividad radica en la temperatura en la que se encuentra, lo cual deja la interrogante de qué sucede con la actividad enzimática cuando se elevan o disminuyen las temperaturas y qué temperaturas producen una mayor o menor actividadenzimática.















MATERIALES Y MÉTODOS
El diseño del experimento es de carácter controlado, ya que se rige dentro de una pauta de elaboración, entregada con anterioridad, al alumnado de la escuela de salud de la Universidad católica de Temuco, en específico, al primer año de la carrera de Terapia Ocupacional. En esta etapa se utilizaron diferentes materiales biológicoscapaces de llevar a cabo una reacción enzimática medible en el laboratorio de baja complejidad
Para la realización del experimento se necesito de diferentes materiales, tanto biológico, químicos y de laboratorio: mechero, rejilla, trípode, tubos de ensayo, gradillas, pipetas graduadas, pinzas de maderas, hígado fresco, trozo de papa, NaCl al 0,25%, almidón, buffer de fosfato,peróxido de hidrogeno y agua destilada.
-Para la realización del primer experimento: Determinación de enzimas en tejidos vivos.
Se utilizaron seis tubos de ensayo, cada uno enumerado, de los cuales tres contenían hígado; el primer tubo guardaba hígado y peróxido de hidrógeno a temperatura ambiente, el segundo tenía líquido hepático extraído del hígado previamente macerado y peróxido dehidrógeno, igualmente en temperatura ambiente, y el tercer tubo; contenía un trozo de hígado el cual fue sometido a ebullición por diez minutos luego de esto se le adicionó el peróxido de hidrógeno.
A los tres tubos restantes se les realizó el mismo procedimiento, pero esta vez el material utilizado fue una muestra de papa.

-Segundo experimento: Efecto de la temperatura sobre la actividadbio.catalítica de una enzima.
Para la realización de este experimento, se utilizaron seis tubos de ensayo cada uno enumerado, de los cuales los tubos 1, 3 y 5 contenían una dilución de amilasa saliva en agua destilada, más un buffer de fosfato, mientras que los tubos 2, 4 y 6 almacenaban en su interior almidón en cloruro de sodio. Los primeros dos tubos fueron sumergidos en hielo para quealcancen una temperatura de 0ºC, los tubos 3 y 4 fueron colocados a baño maría a 37ºC, mientras que los últimos dos fueron puestos a baño maría para que logren la temperatura de 100ºC. Luego de incubarlos durante 5 minutos se vaciaran los tubos 1, 3 y 5 sobre los tubos 2, 4 y 6 respectivamente y se devolverán a sus medio iniciales donde se dejaran por otros 20 minutos.




RESULTADOS...