Actividad Enzimatica

Introducción

Las enzimas son catalizadores proteicos que aceleran la velocidad de
las reacciones metabólicas que ocurren tanto a nivel celular como
fuera de ellas, sin sufrir ellas cambios en su estructura. Para el
proceso de digestión, las biomoléculas ingeridas en la dieta deben
ser degradadas a sus componentes más sencillos para ser absorbidas a
nivel del tubo digestivo y así llegar allugar correspondiente a nivel
celular donde participarán en diversos procesos metabólicos
indispensables para el mantenimiento de una adecuada homeostasis. La
digestión de los carbohidratos comienza en la boca, donde los
alimentos se mezclan con la Amilasa salival que degrada los enlaces
del almidón liberándose Maltosa, Glucosa y dextrinas de almidón que
poseen todos los enlaces.Fundamento
La.acción.de.las.enzimas,.por.sus.características físico-químicas, pueden afectarse.por.las.condiciones.presentes en el lugar de acción de éstas. Entre.los.principales.factores que pueden modificar la acción enzimática tenemos:
La.temperatura
Todas las enzimas muestran cierta termolabilidad, aunque para muchas
de ellas el aumento de la temperatura, hasta cierto límite, acelera lavelocidad de la reacción. Sin embargo, por que la mayoría de éstas son
estructuras proteicas, pueden ser desnaturalizadas a medida que se
aumenta la temperatura y así perder su actividad biológica. La
temperatura a la cual se observa la máxima actividad enzimática se
denomina Temperatura Óptima.
El.pH
Por su característica proteica, muchas enzimas por el pH de donde se
encuentran pueden cambiardesde un estado ionizado (Con carga) a uno
no ionizado (sin carga), afectando así la actividad biológica de las
mismas.
Cada enzima posee un pH característico donde puede realizar su función
(pH óptimo), cualquier variación del mismo puede afectar la acción
enzimática y así afectar la velocidad de las reacciones químicas.

Inductores.e.inhibidores
Existen sustancias químicas que puedenafectar la interacción del
sustrato y la enzima, ya sea aumentando la actividad enzimática
(Inductores).o.disminuyéndola.(Inhibidores).
Los inhibidores tienen gran utilidad en bioquímica, ya que ayudan a
determinar la especificidad de la enzima por el sustrato, la
naturaleza de los grupos funcionales en el mantenimiento de la estructura activa.de.la enzima. Estos compuestos no son alteradosquímicamente por la.enzima.
De acuerdo al tipo de inhibición que ejerzan éstas sustancias, se han
clasificado.en:
•Inhibidores.reversibles.
•Inhibidores Irreversibles
Objetivos
Observar cómo actúa la amilasa (la saliva) como catalizador
sobre el almidón a diferentes temperaturas y determinar la presencia de azucares mediante el reactivo Benedict.
Material
* Tubos de ensaye 1.5 x 1.5 cm* Termómetro
* Vaso de precipitado 250 ml
* Gradilla
* Pipetas de 1.5 y 10 ml
* Tubos de ensaye chicos
* Solución tris HCl a 0.1 M.
* Solución de Lugol
* Reactivo de Benedict
Material bilógico
* 3 ml de saliva (enzima amilasa)
* Almidón 10% (sustrato)

Metodología

Obtener una muestra de la enzima (saliva) de un compañero colocándola en vaso deprecipitado de 250 ml, una vez obtenida se tomara 1 ml con una pipeta y se colocara en 1 un tubo de ensaye de 1.5 ml x 1.5 ml por triplicado, con el fin de obtener tres muestras diferentes que se colocaran en diferentes temperaturas.

Preparación de las muestras en tubos de ensaye.

* Tubo 1: se coloca 1ml de saliva + 5ml de almidón al 10% + 0.8 ml de amortiguador Tris-HCL a 0.1 M (pH 7.5).* Tubo 2: se coloca 1ml de saliva + 5ml de almidón al 10% + 0.8 ml de amortiguador Tris-HCL a 0.1 M (pH 7.5).
* Tubo 3: se coloca 1ml de saliva + 5ml de almidón al 10% + 0.8 ml de amortiguador Tris-HCL a 0.1 M (pH 7.5).
El tubo 1 se incuba a 4 °C durante 30 minutos.
El tubo 2 se incuba a temperatura ambiente durante 30 minutos.
El tubo 3 se incuba a 40 °C durante 30 minutos.

Para...