Actividad Enzimatica

Introducción
La actividad enzimática es una medida de la capacidad de la enzima para convertir su sustrato en su producto. Dependiendo de la enzima típicamente es probada midiendo la cantidad desustrato que es consumido, o la cantidad de producto que se obtiene durante un período especificado de tiempo. Esta actividad se mide generalmente en términos de la unidad de actividad (U) que sedefine como la cantidad que catalizará la transformación de 1 micromol de sustrato por minuto en condiciones estándar (Koolman, et al. 2005).
Las variables más importantes son:
Concentración de enzima,sustratos y productos (incluyendo inhibidores y/o activadores)
pH.
Temperatura.
Están basadas en la medición de la velocidad de reacción como:

Se tendrá que, la velocidad de reacción(pendiente) disminuye continuamente a partir de un valor máximo inicial. Esto se debe a:
Desaturación de la enzima con sustrato, por disminución de la concentración del sustrato.
Inactivación de la enzima porsu inherente inestabilidad.
Inhibición por el producto.
Desplazamiento del equilibrio, si la reacción es reversible (bolibio.com).
La determinación de la actividad de una enzima se realiza pormétodos colorimétricos que requieren de la utilización del espectrofotómetro, que permite medir la cantidad de luz absorbida de una sustancia, preferentemente coloreada. La determinación de laconcentración se realiza al pasar un fino haz de luz a través de una solución. La porción de luz que pasa a través de la solución colorida es la transmitancia porcentual, la luz que no pasa es absorbida por lasolución y es medida como unidades de absorbancia. Las soluciones concentradas dejan pasar menos luz que las diluidas. Así podemos decir que cuanto mayor es la concentración de la solución de enzimamayor es su absorbancia y menos su transmitancia (Fersht, 1980).
Objetivo
Determinar la actividad proteica total de Bacillus sp.
Metodología
Se utilizaron 9 microtubos, donde los primeros 3 se...