ADN INFORMACION
Son ampliamente utilizados en genética humana, vegetal, animal y microbiana. Permiten evidenciar variaciones (polimorfismos) en lasecuencia del ADN entre dos individuos, modifiquen éstas o no su fenotipo. Funcionan como señaladores de diferentes regiones del genoma.
La hemoglobina es una proteína de los glóbulos rojos, que transporta oxígeno a través del cuerpo. El análisis de hemoglobina se utiliza para determinar cuánta hemoglobina hay en la sangre.
Las suspensiones celulares consisten en células libres y agregados celularesdistribuidos en un medio en movimiento. Estas suspensiones pueden ser permanentes mediante el suministro continuo de nutrimentos. Un nutrimento o nutriente es un producto químico procedente del exterior de la célula y que ésta necesita para realizar sus funciones vitales. Es tomado por la célula y transformado en constituyente celular a través de un proceso metabólico de biosíntesis llamadoanabolismo o, bien, es degradado para la obtención de otras moléculas y de energía.
La citometria de flujo (CMF) es una técnica de análisis celular multiparametrico cuyo fundamento se basa en hacer pasar una suspensión de partículas (generalmente células) alineadas y de una en una por delante de un haz de láser focalizado. La citometría de flujo es una tecnología (proceso) que permite la medidasimultánea de múltiples características físicas de una sola célula. Estas medidas son realizadas mientras las células (partículas) pasan en fila, a una velocidad de 500 a 4000 células por segundo, a través del aparato de medida en una corriente de fluido
EL CITOMETRO NECESITA UN SISTEMA COMBINADO DE :
Fluidos, para introducir y restringir las células para análisis
Optica , una fuente de excitación y unsistema colección para generar y recoger las señales luminosas. El sistema de excitación consiste en un láser, lentes y prismas para dirigir el rayo. El sistema de colección consiste en espejos ópticos y filtros para encaminar determinadas longitudes de onda hacia detectores ópticos determinados.
Electrónica, para convertir las señales ópticas en señales electrónicas proporcionales ydigitalizarlas para análisis computacional.
SISTEMA HIDRAULICO: Controles neumático y fluidos para establecer un flujo laminar que permita a la suspensión celular atravesar la cámara de flujo.
SISTEMA OPTICO: Láser (Argón con luz monocromática de 488nm , filtros , lentes y detectores.
SISTEMA ELECTROINFORMATICO: Convierte la luz dispersa en señales eléctricas y las procesa para su análisis.
El impactode cada célula con el rayo de luz produce señales que corresponden a diferentes parámetros de la célula y que son recogidos por distintos detectores.
PARAMETROS
Características Morfológicas de la célula : tamaño y complejidad del citoplasma
Características antigenicas de la célula : Inmunofenotipo.
PARAMETROS FISICOS
Su tamaño relativo (forward scatter-FSC)
Su granularidad relativa ocomplejidad interna ( side scatter SSC).
FLUORESCENCIA RELATIVA (FL1, FL2, FL3)
Determinación cuantitativa de características antigénicas, bioquímicas y biofísicas de células individuales
OBJETIVOS PRINCIPALES DE LA CITOMETRIA DE FLUJO
Identificar y enumerar subpoblaciones celulares únicas y definidas.
Seleccionar y separar físicamente subpoblaciones de células deseadas (por deflección...
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