Adn Vegetal
El estudio de la extracción de ADN vegetal es mucho más extenso y complejo que se parece. En este laboratorio se hizo un desarrollo simple para este procedimiento, en el cual se utilizo como fuente la cebolla cabezona y uva el cual al final por diferencia de densidades entre el ADN y el fluido, este subía a la superficie. Además se hizo un estudio por espectroscopia de resonanciamagnética nuclear, la cual nos dio diferentes picos de resultados y que se deben comparar con otros datos para saber si el material obtenido si concuerda con ADN vegetal,
Palabras claves: ADN vegetal y espectroscopia de resonancia magnética nuclear.
OBJETIVOS:
* Demostrar la presencia de ácidos nucleicos en la cebolla
* Aislar el ADN y el ARN de la cebolla
* Identificar los procesospara la separación del ADN
INTRODUCCION:
Los ácidos nucleicos son compuestos orgánicos y al igual que las proteínas son biopolímeros de alto peso molecular. Una célula contiene entre el 2% y el 5% de ácidos nucleicos.(Madigan, et al, 2003)
El aislamiento del DNA es el principio de muchos métodos de ingeniería genética, nanotecnología de ADN, medicina forense, entre otros. En esta prácticade laboratorio se busca realizar una proteólisis a un tejido vegetal (la cebolla) la cual consiste en la degradación de proteínas por medio de proteasas (enzimas específicas) y de esta manera poder aislar los ácidos nucleicos presentes en el tejido vegetal.
MARCO TEORICO:
La célula vegetal está compuesta por diferentes organelos, los cuales tienen diferentes características y cumplendiferentes tareas para el buen funcionamiento de la célula. El núcleo es un organelo, el cual está rodeado de una membrana propia y en el cual se encuentra el ADN. Dentro de este también se encuentra el nucléolo el cual contiene grandes cantidades de ARN y trazas de ADN (Cambell et al., 2007).
Algunas diferencias entre el ADN y ARN en cuanto a su composición química es la presencia de desoxirribosa yribosa respectivamente. Las bases nitrogenadas se diferencian en cada una, ya que al momento de hacer la replicación, la cadena de ARN tiene el uracilo como pareja de la tiamina. En cuanto a su estructura, el ADN posee una cadena bicatenaria y su función es contener la información genética de la especie la cual da las características que diferencia cada ser vivo, a diferencia del ARN que es unacadena monocatenaria el cual se subdivide en tres tipos; ARNmensajero los cuales llevan la información del núcleo al citoplasma haciendo la traducción de las bases nitrogenadas, el ARNribosomal que junto con las proteínas forman los ribosomas y ARNtranscripción los cuales llevan los aminoácidos para la formación de las proteínas respectivamente. (www.selectividad.net)
Para lograr extraer losácidos nucleicos de los tejidos se debe romper la pared celular que protege el ADN, esto se logra por medio del detergente que rompe los lípidos presentes en la bicapa lipídica haciendo que la parte hidrofóbica capturare las proteínas de las células y por medio de las proteasas se degraden y deje expuesto el material genético al cual se le agrega el alcohol y debido a la polaridad de la molécula de ADNpor su grupo fosfato, quede en la interface entre este y el NaCl, el cual a mayor temperatura mejor será su solubilización. (mundobiotecnologia.blogspot.com).
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
Al líquido de mesa se le debe añadir sal y se debe aforar a 100 ml con agua destilada.
Cortar en pequeños trozos la cebolla.
En un vaso de precipitado mezclar los trozos de cebolla con lasolución antes preparada.
Colocar el vaso de precipitado en un baño termostático por 20 minutos.
Agitar con frecuencia
Luego enfriar la mezcla poniendo el vaso de precipitado en un baño con hielo por 5 minutos.
Licuar la mezcla ya fría por menos de 5 segundos
Espuma no contamine el filtrado
Filtrar a mezcla a un segundo vaso de precipitado.
Añadir a un tubo de ensayo 6 ml de...
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