Adn Y Codigos De Barras
METODOS DE EXTRACCION DE ADN Y AMPLIFICACION DE FRAGMENTOS DE GENES MITOCONDRIALES PARA ESTABLECER CODIGOS DE BARRAS EN INSECTOS
POR:
DANIEL ALEJANDRO RODRIGUEZ AMAYA
ANTEPROYECTO DE TESIS
CATACAMAS, OLANCHO HONDURAS, C.A
MAYO, 2012
UNIVERSIDAD NACIONAL DE AGRICULURA
METODOS DE EXTRACCION DEADN Y AMPLIFICACION DE FRAGMENTOS DE GENES MITOCONDRIALES PARA ESTABLECER CODIGOS DE BARRAS EN INSECTOS
POR:
DANIEL ALEJANDRO RODRIGUEZ AMAYA
ROY MENJIVAR, Ph. D
Asesor Principal
ANTEPROYECTO DE TESIS
PRESENTADO A LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE AGRICULTURA
COMO REQUISITO PREVIO A LA REALIZACION DE LA
PRACTICA PROFESIONAL SUPERVISADA
CATACAMAS, OLANCHOHONDURAS, C.A
MAYO, 2012
CONTENIDO
I. INTRODUCCION 5
II. OBJETIVOS 7
2.1. Genera 7
2.2. Específicos 7
III. HIPOTESIS 8
3.1. Hipótesis nula 8
3.2. Hipótesis alternativa 8
IV. REVISION DE LITERATURA 9
4.1. ADN 9
4.1.1. Replicación del ADN 9
4.2. ADN Mitocondrial 11
4.3. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) 11
4.3.1. Proceso de la Reacción en cadena dela polimerasa (PCR) 13
4.4. Secuenciación del ADN 14
4.4.1. Método enzimático de terminación de cadena o método didesoxi de Sanger 14
4.4.2. Método automático de secuenciación 15
4.5. Códigos de barras de ADN 16
4.5.1. ¿Cómo funciona el código de barras de ADN? 16
V. MATERIALES Y METODOS 18
5.1. Ubicación del experimento 18
5.2. Materiales y equipo 18
5.4. Métodos de extracción deADN 19
5.4.1. Método de calentamiento 19
5.4.2. Método del acetato de potasio modificado 19
5.4.3. Método de bromuro de cetil-trimetil amonio (CTAB) 20
5.5. Pureza del ADN 20
5.6. Reacción en cadena de la polimerasa (PCR) 21
5.7. Secuenciación del ADN 22
VI. Bibliografías 23
I. INTRODUCCION
Cada vez se hace más común que en nuestra vida diaria incorporemos el uso de términos comogen, ADN, diversidad genética, genoma, marcadores moleculares, prueba del ADN y otros; dada la importante aplicación que tienen en la actualidad en diversas áreas (medicina, botánica, conservación, agricultura, etc.), estos términos se pueden ya leer o escuchar en las noticias. Sin embargo, muy poca gente sabe el significado real o las implicaciones que tienen estas palabras, e incluso muchosestudiantes de carreras universitarias, en el mejor de los casos, sólo tienen una idea vaga de lo que significan. (Solís Ramos, L. Y. y Torres, A. A. 2005). Probablemente existan muchas y diferentes razones por las cuales estos términos no son tan manejados por la sociedad.
El objetivo principal de este trabajo es la identificación de especies mediante el uso de códigos de barras, así coma laidentificación de la técnica más adecuada para la extracción de ADN. Donde se dará a conocer un poco, diversos términos y métodos sobre lo que es la biología molecular.
Un factor muy importante en esta investigación es el ADN mitocondrial. A partir de el ADN mitocondrial extraído de los tejidos de organismos en pequeñas cantidades y del cual se obtienen secuencias de un fragmento seleccionado, loscientíficos obtienen una "huella genética", asimilable a un código de barras, único para la identificación de las especies.
La región mencionada corresponde al gen mitocondrial Citocromo oxidasa I, elegida por ser casi idéntica en los individuos de la misma especie, pero diferente al compararla con otras. Por lo tanto, se convierte en una "marca molecular de las especies", según el cálculorealizado en el 2003 por el científico norteamericano D.N. Hebert, del Departamento de Entomología del Museo Nacional de Historia Natural del Instituto Smithsonian en Washington, ahora líder del proyecto en la Universidad de Guelph en Canadá. (Ximena, R. 2009).
En el campo de la entomología agrícola, existe una amplia diversidad de técnicas para el estudio del ADN, diferentes métodos de extracción...
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