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IDENTIFICACION BIOQUIMICA DE MICROORGANISMOS
Ronald Palacios Arias, Eler Rojas Basto, Adriana Flórez, Guillermo Bernal
Cod: 1640481, 1640447, 1640473, 1640475
Estudiante Ingeniería Agroindustrial
Universidad Francisco De Paula Santander
Ronaldhino_1206@hotmail.com

Resumen
Las pruebas bioquímicas son importantes para la identificación del metabolismo microbiano.. Se tiene 8 tubos deensayo con TSI, LIA, RM, CN,SIM, Gelatina, UREA, Citrato y 3 cajas de petri con Agar sangre, Agar almidón y Agar leche al cual se va inocular cepas de e . Coli y bacillus thunringiensis para estudiar los fundamentos de cada medio y el tipo de metabolismo de cada microorganismo. Se procede a inocular E. Coli en los tubos de ensayo a excepción de la gelatina y Bacillus thuringiensis en las cajas depetri y la gelatina según las indicaciones del profesor.se encuba por 18 horas a 35ºc y se procede a tomar los resultados obtenidos.

Palabras claves: E. coli, fermentación azucares, prueba bioquímica, indicadores de pH

Introducción
Las pruebas bioquímicas consisten en distintos test químicos aplicados a medios biológicos, los cuales, conocida su reacción, nos permiten identificar distintosmicroorganismos presentes Su sistema de funcionamiento generalmente consiste en determinar la actividad de una vía metabólica a partir de un sustrato que se incorpora en un medio de cultivo y que la bacteria al crecer incorpora o no. Para realizar las pruebas bioquímicas se dispone de múltiples medios, los cuales se deben aplicar de acuerdo a las exigencias del microorganismo en estudio. De laamplia variedad de pruebas bioquímicas, nosotros en laboratorio utilizaremos 10, aplicados a 5 especies de microorganismos. Además estudiaremos los resultados que estos test arrojan, comparando resultados experimentales entre los distintos grupos de trabajo de nuestro laboratorio.
Materiales y procedimiento
E.coli, bacillus thuringiensis, y bioquímicas: SIM, RM. Citrato, TSI, LIA, agar leche, agarsangre, agar almidón, gelatina, urea.
Tomar una muestra inoculo de la cepa en el asa .se inocula la cepa en cada una de las pruebas,:
Agar sangre, leche y almidón se siembra por agotamiento y se inocula Bacillus thunringiensis,
SIM. Se siembra E.Coli mediante una puncion
Urea, RM se siembra introduciendo el aza con la E. coli y agitándola dentro del medio.
Citrato se inocula E. coli enzigzag en el bisel
TSI y LIA se siembra E coli en el bisel por zigzag y por puncion una para el TSI y dos para LIA
Gelatina se siembre igual que la urea o RM pero con Bacillus thuringiensis
Después se lleva a incubación por 18 a 24 horas a 35 ‘C y se toman las observaciones y se estudian los resultados obtenidos.

Fig 1 Agar sangre

Fig 2 Agar leche

Fig 3 Agar almidon

Fig 4 SIMFig 5 Urea

Fig 6 Citrato

Fig 7 Rojo metilo

Fig 8 LIA

Fig 9 TSI

Fig 10tomando la cepa de BT

Fig 11 Sembrando en el bisel de LIA

Fig 12 sembrando en el RM

Fig 13 inoculando en agar sangre

Fig 14 Sembrando agar almidon

Fig 15 Hemolisis α del BT

Fig 16 Agar almidon

Fig 17 Agar leche

Fig 18 Citrato (-)

Fig 19 SIM

Fig 20 TSI

Fig 21 LIA

Fig 22 Urea (-)Resultados y Discusiones
Agar sangre Detecta la presencia de hemolisina, enzima que permite la clasificación de los en alfa (hemólisis parcial, incompleta que torna color verdoso), beta (hemólisis total) y gamma hemolíticos (no existe hemólisis). Se usa el cultivo para demostrar el grado de hemólisis (hemólisis beta) en la cual se puede observar claramente por detrás de la siembra [1].
Para elBT (bacillus thuringiensis) se obtuvo Hemolisis α (ver figura 15)
Agar almidón: Las bacterias pueden usar alimentos macromoleculares; para ello, es necesario una hidrólisis extracelular preliminar, igual que sucede en los animales superiores. Las distintas bacterias elaboran para este fin una cierta variedad de enzimas extracelulares que se segregan al medio.
El objetivo de esta práctica es...