Agar Chocolate
Agar Chocolate (CHOC) es un medio de cultivo enriquecido y no selectivo. Es una variante delagar sangre. Contiene glóbulos rojos, que han sido lisados por el suave calentamiento a 56 °C. Este agar se usa para el delicado y exigente crecimiento de bacterias respiratorias, como por ejemplo Haemophilus influenzae.
Estas bacterias necesitan factores de crecimiento, como el NAD y hematina, componentes que podemos encontrar dentro de los glóbulos rojos; por lo tanto, un pre-requisito lógico parael crecimiento es la lisis de los glóbulos rojos. El agar se llama así debido a su parecido con el chocolate, pero no contiene nada de este.
Debido a que este medio soporta muchos tipos de bacterias, no es muy útil para coprocultivos.
Chocolate Polyvitex (= Agar chocolate)
Este medio utiliza la misma base que el Ágar Sangre. Antiguamente se añadían los hematies a la base fundida y se elevabala temperatura para lisarlos parcialmente y que soltasen al medio, sus componentes. Esto daba al medio su habitual color pardo chocolate.
El Agar chocolate es un medio destinado principalmente al aislamiento de gonococos y meningococos, pero en el que pueden crecer muchos otros microorganismos exigentes. Con un medio análogo a éste es con el que Thayer y Martin han hecho sus primeros asilamientosselectivos de gonococos, después de añadir antibióticos.
El Agar chocolate lleva Hemoglobina que aporta al medio un importante elemento para el crecimiento: el factor X o Hemina termoestable.
Otros factores, en particular el factor V (dicotín-adenina nucleótido) termosensible, que no se encuentran en el Agar chocolate pueden aportarse en una mezcla químicamente definida: el PolyViteX.
El Agarchocolate con PolyViteX permite el cultivo de la mayor parte de los gérmenes encontrados en patología humana o veterinaria.
La siembra de líquidos cefalorraquídeos, pus, resiembra de hemocultivos, etc., es favorable en este medio, pero está particularmente indicado para aislamiento de las Neisserias patógenas y de los Haemophilus.
Aislamiento e identificación de Haemophilus
Los microorganismosdel género Haemophilus se cultivan en Agar chocolate con PolyVitex. Como en el caso del gonococo el cultivo es rápido y abundante sobre todo en atmósfera rica en C02. Estos gérmenes encuentran en este medio los factores X y V necesarios para su crecimiento. El diagnóstico de la serie al respecto puede conducirse de la manera siguiente:
Si se siembra en cuatro medios diferentes:
-AgarTrypcase-soja que no contenga ni factor V, ni factor X
-Agar Trypcase-soja con PolyViteX (factor V)
-Agar chocolate (factor X)
- Agar chocolate con PolyVitex (factores X y V)
El recuadro que se da a continuación indica los resultados obtenidos en estas condiciones con los principales Haemophilus:
H. parainfluenzae crece en Trypcase soja con PolyViteX (V) y en chocolate con PolyViteX (V yX)
H.aphrophilus crece Chocolate (X) y en chocolate con PolyViteX (V yX)
H. influenzae, H. haemolyticus, H. aegiptius crecen en los 4 medios
Otras pruebas que ayudan a diferenciarlos:
H. aegiptius aglutina hematies humanos (prueba en porta), H. influenzae no los aglutina
H. haemolyticus da hemólisis en Agar con 5% de sangre de caballo
El agar sangre principalmente se puede hacer con un agarnutritivo base que posea sangre ovina, bovina o humana al 5% (generalmente) y se procede con la utilización de perlas de vidrio que ayudan a "desarmar" el fibrinógeno y que no se cree un coágulo, luego se calienta hasta los 45°C
Agar sangre: Es un medio enriquecido que se utiliza además para la investigación de los diversos tipos de hemólisis(α, ß ó gamma ). Se utiliza para el crecimiento de...
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