Agar TSI
B0213406
T.S.I. Agar
(Triple Sugar Iron Agar)
USO
Medio universalmente empleado para la diferenciación de enterobacterias, en base a la fermentación de los hidratos de carbono
glucosa, lactosa y sacarosa y a la producción de ácido sulfhídrico.
FUNDAMENTO
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollobacteriano.
La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la
producción de ácido sulfhídrico, el sulfato de hierro y amonio, es la
fuente de iones Fe3+ , los cuales se combinan con el ácido sulfhídrico y producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de fenol
es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene elbalance
osmótico. El agar es el agente solidificante.
Por fermentación de azúcares, se producen ácidos, que se detectan
por medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo
en medio ácido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrógeno que reacciona luego con una sal de hierro proporcionando el
típico sulfuro de hierro de color negro.
CONTENIDO Y COMPOSICIÓN
CódigoB0213405: envase x 100 g.
Código B0213406: envase x 500 g.
INSTRUCCIONES
Suspender 62,5 g del polvo en 1 litro de agua purificada. Dejar
reposar 5 minutos. Mezclar bien, calentar con agitación frecuente
y hervir 1 o 2 minutos hasta disolución total. Distribuir en tubos,
llenandolos con un volumen que ocupe hasta la tercera parte de los
mismos. Esterilizar en autoclave a 121°C por 15minutos.
Enfriar y dejar solidificar el agar en pico de flauta profundo.
CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO
Medio de cultivo deshidratado: color beige claro, homogéneo, libre
deslizamiento.
Medio de cultivo preparado: color rojo.
ALMACENAMIENTO
Medio de cultivo deshidratado a 10-35 ºC.
Medio de cultivo preparado a 2-8 ºC.
PROCEDIMIENTO
Siembra
A partir de un cultivo puro del microorganismo enestudio, con aguja
de inoculación inocular el medio de cultivo, picando el fondo y extendiendo sobre la superficie del mismo.
Incubación
En aerobiosis, a 35-37°C durante 18 a 24 horas.
FÓRMULA (en gramos por litro)
EXTRACTO DE CARNE...................................................................................................... 3.0.PLURIPEPTONA....................................................................................................................20.0.
CLORURO DE SODIO.......................................................................................................... 5.0.
LACTOSA......................................................................................................................................10.0.SACAROSA.................................................................................................................................10.0.
GLUCOSA....................................................................................................................................... 1.0.
SULFATO DE HIERRO Y AMONIO.......................................................................... 0.2.
TIOSULFATO DESODIO.................................................................................................... 0.2.
ROJO DE FENOL.............................................................................................................. 0.025.
AGAR................................................................................................................................................13.0.
pH FINAL: 7.3 ± 0.2INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
Observar el color del medio de cultivo y la producción de gas.
1- Superficie alcalina/profundidad ácida (pico rojo/fondo
amarillo): el microorganismo solamente fermenta la glucosa.
2- Superficie ácida/Profundidad ácida (pico amarillo/fondo
amarillo): el microorganismo fermenta glucosa, lactosa y/o sacarosa.
3- Superficie alcalina/Profundidad alcalina (pico...
Regístrate para leer el documento completo.