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BD Pseudosel Agar (Cetrimide Agar)
USO PREVISTO
BD Pseudosel Agar (agar cetrimida) se utiliza para el aislamiento selectivo de Pseudomonas aeruginosa a partir de muestras clínicas.
PRINCIPIOS Y EXPLICACION DEL PROCEDIMIENTO
Método microbiológico. Pseudomonas aeruginosa es un organismo en el medio ambiente y un importante patógeno nosocomial1. BD Pseudosel Agar se basa en la fórmula deagar Tech, diseñado por King et al para la producción mayor de piocianina de Pseudomonas aeruginosa, pero se ha modificado con la adición de cetrimida para la inhibición selectiva de organismos diferentes de P. aeruginosa 2,3. El medio se utiliza para el aislamiento de P. aeruginosa en los campos tanto clínicos como farmacéuticos, y se menciona en la farmacopea de Estados Unidos y la farmacopeaeuropea para uso en pruebas de límite microbiano1,3-5.En BD Pseudosel Agar, la peptona sirve como fuente de nitrógeno, y el glicerol se utiliza como fuente de carbono y energía. La producción de piocianina se estimula mediante el cloruro de magnesio y el sulfato potásico en el medio. La cetrimida (bromuro de cetil trimetil amonio) es un compuesto de amonio cuaternario que inhibe una amplia variedad deotros organismos, incluidos otras determinadas especies de Pseudomonas y organismos relacionados.
REACTIVOS
BD Pseudosel Agar
Fórmula* por litro de agua purificada
Digerido pancreático de gelatina 20,0 g
Cloruro de magnesio 1,4
Sulfato de potasio 10,0
Glicerol 10,0 ml
Cetrimida 0,3 g
Agar 13,6
pH 7,2 ± 0,2
*Ajustada y/o suplementada para satisfacer los criterios derendimiento.

E.M.B. Agar.
Este medio (también denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento selectivo de bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae.
Fundamento 
Este medio combina las fórmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en elaislamiento selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. La diferenciación entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, está dada por los indicadores eosina y azul de metileno; éstos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas. Muchas cepas de Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan uncaracterístico brillo metálico. Las cepas que utilizan la lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada o rosada, mientras que las que no lo hacen son incoloras. Este medio permite el crecimiento de Candida spp. como colonias rosadas y puntiformes; la siembra en profundidad permite el desarrollo de clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp. crece en este medio como colonias puntiformes ytransparentes, mientras que Acinetobacter spp. y otras bacterias oxidativas pueden dar colonias de color azul lavanda; esto puede ocurrir aunque las cepas no sean capaces de acidificar a partir de lactosa al 0.5% y ello se debe a la incorporación de azul de metileno a sus membranas. En este medio se obtiene además, un buen desarrollo de especies de Salmonella y Shigella.
Fórmula (en gramos porlitro)
Instrucciones
  Peptona 
10.0
Suspender 36 g del polvo en un litro de agua destilada. Reposar 5 minutos; mezclar, calentando a ebullición durante 1 o 2 minutos hasta su disolución. Esterilizar en autoclave a no más de 121°C durante 15 minutos. Enfriar a 45°C y distribuir agitando suavemente.
  Lactosa
5.0

  Sacarosa
5.0

  Fosfato dipotásico
2.0

  Agar
13.5

  Eosina
0.4  Azul de metileno
0.065

pH final: 7.2 ± 0.2
Siembra
En superficie, por estriado a partir de un inóculo poco denso, para obtener colonias aisladas. 
En profundidad, para favorecer el desarrollo de clamidosporas.
Incubación
De 24 a 48 horas a 35-37 °C, en aerobiosis.

Resultados
Microorganismos
Tipo de Colonia
Escherichia coli ATCC 25922
Verdosas con brillo metálico y centro negro...