Agronomia

TECNICAS ASÉPTICAS EN UN LABORATORIO MICROBIOLÓGICO


METODOS DE ESTERILIZACION

Agentes esterilizantes

Agentes físicos. Temperaturas como parámetro principal:
- Autoclave de vapor
- Horno con ventilador
- Filtros de membrana
Autoclave de laboratorio
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Un autoclave de laboratorio es un dispositivo que sirve para esterilizar material de laboratorio, utilizando vapor deagua a alta presión y temperatura, evitando con las altas presiones que el agua llegue a ebullir a pesar de su alta temperatura. El fundamento del autoclave es que coagula las proteínas de los microorganismos debido a la presión y temperatura, aunque recientemente se ha llegado a saber de algunas formas acelulares, tal como los priones, que pueden soportar las temperaturas de autoclave.
Lasautoclaves funcionan permitiendo la entrada o generación de vapor de agua pero restringiendo su salida, hasta obtener una presión interna de 103 kPa, lo cual provoca que el vapor alcance una temperatura de 121 grados centígrados. Un tiempo típico de esterilización a esta temperatura y presión es de 15-20 minutos. Las autoclaves más modernos permiten realizar procesos a mayores temperaturas y presiones,con ciclos estándares a 134 °C a 200 kPa durante 5 min para esterilizar material metálico; llegando incluso a realizar ciclos de vacío para acelerar el secado del material esterilizado.
El hecho de contener fluido a alta presión implica que las autoclaves deben ser de manufactura sólida, usualmente en metal, y que se procure construirlas totalmente herméticas.
Las autoclaves son ampliamenteutilizadas en laboratorios, como una medida elemental de esterilización de material. Aunque cabe notar que debido a que el proceso involucra vapor de agua a alta temperatura, ciertos materiales no pueden ser esterilizados en autoclave, como el papel y muchos plásticos (a excepción del polipropileno).
Este producto es de uso general en laboratorio y no es un producto sanitario por tanto no llevamarcado CE según la directiva 93/42/EEC ni le es de aplicación esta legislación. Cuando el autoclave está destinado a la esterilización de productos sanitarios tiene unos requisitos especiales.
Funcionamiento
Debido a que el material a esterilizar es muy probablemente de uso grabable, se requiere de métodos de testificación de la calidad de dicha esterilización, esto quiere decir que la presión ytemperatura aplicadas serán distintas para cada uno de los productos autoclavados.
Las autoclaves suelen estar provistas de medidores de presión y temperatura, que permiten verificar el funcionamiento del aparato. Aunque en el mercado existen métodos testigo anexos, por ejemplo, testigos químicos que cambian de color cuando cierta temperatura es alcanzada, o bien testigos mecánicos que se deformanante las altas temperaturas. Por este medio es posible esterilizar todo tipo de materiales a excepción de materiales volátiles, por lo que se debe tener gran precaución.

Agentes químico:
- Gaseosos: cámara de óxido de etileno.
- Cámara o autoclave de formaldehído.
- Líquido en soluciones: glutaraldehído en solución acuosa al 2 %.
. Formaldehído en solución acuosa al 4 %.
. Formaldehído ensolución acuosa al 8 %.


Es el procedimiento más utilizado y fiable para la esterilización.  A través de ella podemos esterilizar: medios de cultivo, agua, jeringas, instrumental vario, objetos de goma y tela...   Este tipo de esterilización se realiza por vapor a presión y es una forma muy efectiva de realizar la destrucción de gérmenes y de esporas. Se mantiene a una temperatura de 115º C,durante unos 20 minutos.

NORMAS DE SEGURIDAD AL USAR EL AUTOCLAVE

a) El lugar en donde el Autoclave permanece debe ser limpio, por el trabajo que hace.

b) El Autoclave tiene que ser limpiado por lo menos cada 3 días del tanque y cámara, así como las partes externas, luego de terminar de ocuparlo cada día, desagüe el generador luego de haberlo desocupado, y antes de limpiarlo asegúrese...