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Universidad de Los Andes Facultad de Odontología Departamento de Biopatología Cátedra de Microbiología 2º Año, U-2009 Práctica Nº 3 Antibiograma, solicitud e interpretación de análisis de laboratorio

Profesores: Lic. Leonidas E. Urdaneta P. M.Sc. en Microbiología Clínica Profesor Agregado

Farm. Soley Chidiak Tawil Profesora Asistente

Introducción: El establecimiento de una correcta yexitosa terapia antibacteriana depende no sólo de conocer la amplia gama de antibacterianos existentes, su mecanismo de acción, espectro de acción, farmacodinámica y farmacocinética; sino también del uso de herramientas fundamentales como resultan ser las pruebas de evaluación de la susceptibilidad bacteriana a dichos agentes quimioterápicos. El laboratorio de Microbiología debería estar en capacidadde responder a las necesidades del odontólogo en lo referente a la valoración de la actividad antimicrobiana “in Vitro”. De igual forma el Odontólogo debería tener los conocimientos mínimos necesarios para reconocer la pericia del Microbiólogo y lograr leer e interpretar de manera apropiada todo resultado que emerja de un análisis microbiológico solicitado. Una de las técnicas más utilizadas enMicrobiología para determinar la sensibilidad a un antibacteriano es la prueba de difusión en agar, conocida también como el método de Kirby Bauer. Este método limita su funcionalidad a determinar la capacidad inhibitoria de varios agentes antibacterianos sobre un solo microorganismo en particular, y para ello hace uso de discos de papel contentivos de antibióticos colocados sobre la superficie deun agar (generalmente agar Müeller Hinton, el cual debe estar suplementado con 5% de sangre para bacterias exigentes como los estreptococos) previamente inoculada con la bacteria a ensayar, determinando así la capacidad de la misma de resistir o no a la acción del agente químico, por la medición del halo de inhibición (en milímetros) que se pueda generar y la comparación del mismo con losparámetros establecidos por el actual CLSI (Clinical and 1

Laboratory Standards Instituto) antes conocido como la National Commission for Clinical and Laboratory Standards (NCCLS), organización global, no lucrativa, que se encarga de

estandarizar, desarrollar y promover el desarrollo y el uso de las pautas establecidas para el consenso dentro de la comunidad del cuidado de la salud. La prueba deKirby Bauer además permite, de una manera rápida, sencilla y específica, seleccionar el tratamiento más adecuado para una enfermedad infecciosa, ya que trabaja directamente con el microorganismo recuperado del paciente, facilitando la toma de decisiones. El método favorece la difusión del fármaco en el agar y dependiendo del antibiótico dicha difusión va a desarrollarse a una velocidad diferente porlo que se hace necesario el cuadro de normalidad señalado por el CLSI. Existen otras técnicas para determinar la susceptibilidad bacteriana ante algún fármaco, tales como las pruebas de dilución en agar, dilución en caldo, la prueba epsilométrica o E-Test, el nivel bactericida del suero, entre otras. Cada una de ellas puede aportar información relevante y diferente, incluyendo en algunos casos, ladeterminación de la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) y la Concentración Máxima Bactericida (CMB).

Objetivos: • • Reconocer el procedimiento adecuado en la realización de una prueba de difusión de antibiótico en placa. Fomentar la iniciativa del profesional de la odontología en el fortalecimiento de los procesos de comunicación efectiva con otros profesionales de la salud, en particularcon el laboratorio de Microbiología. • • Reforzar los conocimientos teóricos referentes a antibacterianos, su mecanismo y espectro de acción. Incentivar al desarrollo de un criterio científico bien fundamentado para la lectura e interpretación del antibiograma.

PRUEBA Nº 1: DIFUSIÓN DE DISCO EN PLACA (MÉTODO DE KIRBY BAUER)

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Esta técnica es aplicable a la mayoría de las bacterias...