Agua Y Saneamiento Basico

Modulo de Formación: Vigilancia y Control de Riesgos a la Salud y el Ambiente
LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA EN ALIMENTOS
TECNICA DEL NÚMERO MÁS PROBABLE


JUSTIFICACION

Este laboratorio se realiza porque es de gran importancia el análisis microbiológico de nuestros alimentos y el agua que consumimos, ya que la presencia de microorganismos como son las coliformes totales, nos indica lacontaminación por materia de origen fecal y la mala calidad al preparar los alimentos sin ningún control en su manipulación, por lo tanto la falta de higiene pone en riesgo la salud humana y la del medio ambiente.

OBJETIVOS

* Realizar el procedimiento para determinar la coliformes totales en aguas y alimentos con la técnica del número más probable.

* Preparar las diluciones lascuales sirven para el crecimiento de los microorganismos

* Analizar si existe o no la presencia de coliformes fecales en el agua y en la ensalada de verduras

MATERIALES Y REACTIVOS PARA EL LABORATORIO

* Tubos tapa rosca
* Frasco tapa rosca microbiológico
* Tubo campana Durham
* Beaker
* Pipetas bacteriológicas
* Gradillas
* Autoclave incubadora a 35°C+/-2°C
* Balanza
* Cámara de flujo laminar
* Caldo lauril sulfato
* Agua peptonada
* Caldo Brila

ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DEL AGUA

Técnica numero más probable NMP, o tubos múltiples de fermentación.
El método empleado es el cultivo de caldo lauril sulfato o concentración doble y a concentración sencilla se lee positivo por turbiedad y por burbujas de gas en la campana otubo de Durham los tubos se encuentran a 35ºC de 24 a 48 horas el recipiente para la toma de la muestra debe ser suministrado por el laboratorio por que sus características no deben alterar la muestra por lo tanto el recipiente tiene que estar esterilizado.

Añadir 35,6 gr. a un litro de agua de cultivo caldo lauril sulfato doble.
Concentración doble:
35,6gr--------------1000ml
X10 ml

X= 0,35gr, y le agregamos 10ml de agua destilada.
Concentración sencilla:
35,6gr = 17,8gr
2
17,8gr ---------1000
X 10ml
X= 0,17gr y le agregamos 10ml de agua destilada
Pesamos en la balanza analítica y luego se coloca a calentar hasta que salga una burbuja para que este disuelto


Luego el caldo se lo coloca en un tubo de ensayo y le colocamos el tuboDurham o campana lo cerramos, con la boca de la campana o tubo Durham hacia abajo.

Lo llevamos al auto clave dentro de un beaker, el auto clave funciona con agua destilada, y actúa como una olla presión esto con el fin de esterilizar los tubos y elementos de laboratorio.

Después de que las muestras estén dentro del auto clave se abre la válvula suplidora de de agua para permitir el paso deagua destilada hacia el interior del autoclave.

Que esteriliza a una temperatura de 127ºC ejerciendo 15 libras de presión, durante 10 a 15 minutos, esto dependiendo de las instrucciones del caldo.

CAMARA DE FLUJO LAMINAR
Tiene un flujo de aire que expulsa todos los microorganismos al exterior y además tiene una luz ultravioleta la cual daña los puentes de hidrogeno de las basesnitrogenadas del ADN de los microorganismos (corta los nitrógenos).
La luz ultravioleta prende 30 minutos.

En la cámara se siembran los medios de cultivo y todos los procesos microbiológicos que necesitan estar esterilizados.
Se destapa la pipeta por la parte más gruesa y se agita el frasco de la muestra luego pipetear 10ml de la muestra A reservorio.

CONCENTRACION COMPUESTA
1. en el primer tubosolo el caldo para que sirva de comparador ( blanco)
2. en los 5 tubos restantes se les agrega 10ml de la muestra

CONCENTRACIÓN SIMPLE
1. en el primer tubo solo el caldo para que sirva de comparador ( blanco)

2. en los 5 tubos restantes se le agrega 1ml de la muestra
Para diluir mas la concentración prepare una dilución de 0,1 ml de la muestra y 9 ml de agua peptonada se...