AISLAMIENTO AXÉNICO DE CAMPYLOBACTER

OBJETIVO
Esta práctica posee como objetivo cardinal, la búsqueda, aislamiento y cultivo axenico de algún microorganismo. Dicho organismo seleccionado por nosotros (entereobacter) debe ser identificado por algún método bioquímico, tinción etc. cualquier prueba fidedigna que exponga sus condiciones como organismo para su identificación.

INTRODUCCIÓN

CAMPYLOBACTER es una causaimportante con un origen lactante, especialmente es países en desarrollo, y/o condiciones salubres bajas; Dicho organismo se adhiere a las células de la mucosa del intestino delgado. Sus factores de virulencia favorecen la adhesión y en ocasiones penetra a las células mucosas. La infección por campylobacter provoca diarrea acuosa generalmente autolimitada aunque en ocasiones puede ser crónica.Patogénesis. El microorganismo produce dos proteínas: la intimina que es codificada por el gen eae y un factor de adherencia que es codificado por un plásmido, ambas proteínas permite su unión a los enterocitos y la destrucción de las microvellosidades intestinales. Forma parte del endógeno humano gastrointestinal (GI) microflora. También reside en el suelo, el agua y en los PRODUCTOS LÁCTEOS. Generalmentelas infecciones surgen de la flora de los propios pacientes, sin embargo la infección cruzada puede ocurrir a través de las manos de los trabajadores de la salud, durante la inserción de los dispositivos médicos y en los procedimientos quirúrgicos. Las superficies contaminadas pueden jugar un papel en la transmisión de Enterobacter, particularmente durante los brotes.
Las especies del géneroCampylobacter agrupan bacilos Gram negativos curvos, espirilados o en forma de S que presenta un flagelo único en uno o ambos extremos. En cultivos de varios días (mas de tres) degeneran en formas esféricas u ovoides que han perdido su viabilidad. Los diferentes nombres que han recibido las diferentes especies de Campylobacter han dificultado la utilización de una nomenclatura universal. Al comienzo,estos microorganismos fueron clasificados dentro del género Vibrio. Sin embargo, mas tarde, debido a que presentan diferencias fundamentales con relación a la constitución del DNA y por su incapacidad de fermentar los hidratos de carbono, fueron agrupados en un nuevo género bacteriano denominado campylobacter (campylo = curvo) (bacter = bacteria). Actualmente se han incorporado nuevas especies yse ha creado la familia Campylobacteriaceae, la cual está compuesta por dos géneros: Campylobacter y Arcobacter; y un género de afiliación incierta Helicobacter. Las diferencias fundamentales entre los géneros de Campylobacter y Arcobacter son que Campylobacter no puede crecer a 15°C, es móvil por un solo flagelo polar en uno o sus dos extremos y en cultivos viejos degeneran a formas cocoides;Arcobacter tiene un solo flagelo, crece bien a bajas temperaturas (17°C) pero mal a 37°C y 42°C, a 30°C pueden crecer aeróbicamente.

MATERIALES Y MÉTODOS

• Mechero
• Pipeta
• Gradilla.
• Lentes de seguridad
• Pipetas de 10.0 mL estériles
• Pipetas de 1.0 mL estériles
• Pipetas Pasteur estériles
• Asa bacteriológica
• Portaobjetos
• Termómetro
• Baño de agua a 44.5° ± 0,1°C.b• Incubadora a 28°C - 30°C ± 2,0ºCa (MUESTRA DE ALIMENTOS)
Incubadora a 28°C - 30°C ± 2,0ºCa (MUESTRA DE ANIMALES)
• Autoclave


MUESTRAS
Las muestras de deposiciones pueden ser tomadas con hisopo rectal o bien por evacuación espontánea, pudiendo mantenerse a temperatura ambiente, por algunas horas, evitando su desecación. La refrigeración de las muestras prolonga por variosdías la sobrevida del microorganismo. Si es necesario usar un medio de transporte, debe utilizarse el medio Cary Blair modificado por la reducción de la concentración de agar en un 0,12% (ver ANEXOS, Medios de Cultivo).



PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS
Las muestras pueden conservarse refrigeradas y protegidas del aire durante una a tres semanas. Una vez abiertos los envases deben ser...