Aislamiento De ADN

Aislamiento de ADN
Introducción
Los ácidos nucleicos son polímeros de nucleótidos unidos por enlaces fosfodiéster. Por su composición química, los ácidos nucleicos se han clasificado en dostipos: el ácido desoxirribonucleico (DNA) y el ácido ribonucleico (RNA), los nucleótidos que forman el DNA esta constituido por el azúcar 2’-desoxirribosa unido mediante un enlace glucosúrico a una basenitrogenada (adenina, guanina, timina y citosina), las cuales a su vez forman dos cadenas de polímeros generado una molécula de doble hélice. Los nucleótidos del RNA se encuentran formados por azúcarribosa que se une con glucosidico a una base nitrogenada (adenina, guanina, uracilo y citosina) formando moléculas de una sola cadena.
El genoma se encuentra organizado en forma diferente en lacélulas procariotas y eucariotas, presentándose en estas últimas un mayor grado de complejidad. El genoma de las células procariotas está comprendido dentro de una sola molécula de ADN circular, dispuestade modo compacto en una zona nuclear denominada nucleótido. El tamaño del genoma bacteriano se puede ejemplificar con el de Escherichia coli cuyo tamaño es de 1360 nm y se encuentra constituido por4700 pares de bases (kpb).
Según el tipo de célula en estudio, el aislamiento de los ácidos nucleicos requiere romper la membrana y la pared celular mediante el empleo de métodos físicos, químicos oenzimáticos con el fin de liberarlas moléculas de DNA al medio extracelular. Posteriormente, se realizara la purificación de los ácidos nucleicos extrayendo las proteínas y los lípidos con solventesorgánicos, para finalmente recuperarlos mediante la precipitación con alcohol (isopropanol o etanol).
Material
Gradilla.
Pipetas de 1 y 5 ml.
NaOH 0.2 N.
Etanol absoluto frio.
Bacterias de cultivo(E, coli.)
Procedimiento
Tomar 5 ml de cultivo de bacteria y centrifugar 5 min. Decantar el sobre sedante.
Re suspender el sedimento bacteriano en .8 ml de H2O.
Adicionar 1.6ml de la solución...