Aislamiento de arn en levadura

Aislamiento del ARN en levadura

I. Objetivos:

* Aislar el ARN presente en la levadura.
* Analizar la función de cada reactivo en la separación del ARN.
* Utilizar el proceso de centrifugación como método para la separación del ARN.

II. Marco Teórico
El ARN es un ácido nucleico formado por una cadena de ribonucleótidos. Está presente tanto en las células procariotascomo en las eucariotas, y es el único material genético de ciertos virus (virus ARN). El ARN celular es lineal y de hebra sencilla, pero en el genoma de algunos virus es de doble hebra.
En los organismos celulares desempeña diversas funciones. Es la molécula que dirige las etapas intermedias de la síntesis proteica; el ADN no puede actuar solo, y se vale del ARN para transferir esta informaciónvital durante la síntesis de proteínas (producción de las proteínas que necesita la célula para sus actividades y su desarrollo). Varios tipos de ARN regulan la expresión génica, mientras que otros tienen actividad catalítica. El ARN es, pues, mucho más versátil que el ADN.
Los ácidos ribonucleicos constan de largas cadenas de ribunucleótidos, y aunque son mucho más cortos que los ADNs, son muchomás abundantes en la mayoría de las células. Tanto en las células procarióticas como en las eucarióticas, las tres clases principales de ARN son el ARN mensajero (mARN), el ARN ribosómico (rARN) y el ARN de transferencia (tARN). Cada uno de ellos consta de una sola cadena de ribonucleótidos y posee un peso molecular, una secuencia nucleotídica y una función biológica característica. El ARN mensajeroactúa como matriz utilizada por los ribosomas para la traducción de la información genética en la secuencia aminoácido de las proteínas. La secuencia nucleotídica del mARN es complementaria al mensaje genético contenido en su segmento especifico de la cadena patrón del ADN. En una célula eucariótica pueden existir 104 moléculas de mARN distintas, cada una de las cuales modifica una o más cadenaspolipeptídicas diferentes.
III. Materiales y Reactivos

Materiales
Cuadro de materiales
Material | Cantidad | Capacidad |
termómetro | 1 | --- |
Policial | 1 | ---- |
Balanza Analítica | 1 | ---- |
Baño maría | 1 | ---- |
Probeta | 1 | 100 mL |
Centrifugadora | 1 | ---- |
Vaso Químico | 2 | 250 mL |
Tubos para centrifugar | 6 | ---- |
Agitador | 1 | --- |
hielo | ---| --- |
Frasco ámbar | 1 | ---- |
Levadura | 6 gramos | ---- |

Cuadro de Reactivos
Reactivo | Cantidad | Propiedades Físicas y Químicas | Toxicidad |
fenol | 10 mL | punto de fusión: 43 °C punto de ebullición: 182 °Capariencia : Blanco-incolorodensidad: 1.070 kg/m3; 1.07 g/cm3masa molar: 94.11 g/molacidez: 9.95solubilidad en agua: 8.3 g/100 ml (20 °C) | De ser ingerido en a altasconcentraciones, puede causar envenenamientos, vómitos decoloración en la piel e irritación respiratoria. |
Etanol | 95% | Estado de agregación: líquidoDensidad: 0,789 g/cm3Punto de Fusión:-114.3 °CPunto de Ebullición: 78.4 °CAcidez: 15,9Solubilidad en agua: miscible | El etanol puede afectar al sistema nervioso central, provocando estados de euforia, desinhibición, mareos, somnolencia,confusión, ilusiones |
Acetato de potasio | 12 mL | Apariencia : polvo cristalinoDensidad 1.57 kg/m3; 0,00157 g/cm3Acidez : 9.7 (0.1 M solutionMasa molar : 98.15 g/mol | En caso de enrojecimiento en la piel , Aclarar y lavar la piel con agua y jabón y solicitar atención médica |
Éter etílico | 10 mL | Apariencia :IncoloroEstado : liquidoDensidad : 0.7134 g/cm3Punto de fusión : 156.85 KPuntode ebullición : 307.75 K | Por ingestión la exposición repetida puede provocar sequedad o formación de grietas |

IV. Procedimiento

* Se disolvió 6 g de levadura seca en 8 mL de agua, luego esta solución se colocó en un baño a 37 °C por 15 minutos.
* Se agregó 30 mL de cloroformo a la solución de levadura-agua y se agitó por 30 minutos a temperatura ambiente.
* Enfriamos la...