Aislamiento de bacterias productoras de proteasas

Justificación
El aislamiento de bacterias productoras de proteasas es una herramienta importante para los estudiantes de la asignatura de Microbiología Aplicada, en virtud de que esas enzimastienen amplias aplicaciones en la industria.
Objetivo
El objetivo de esta práctica es aislar bacterias productoras de proteasas mediante la observación de halos de hidrólisis en medio de cultivo lechedescremada-agar.

Introducción

Las peptidasas (antes conocidas como proteasas) son enzimas que rompen los enlaces peptídicos de las proteínas. Usan una molécula de agua para hacerlo y por lotanto se clasifican como hidrolasas.
Las enzimas proteolíticas se encuentran en todas las células y tejidos en donde degradan proteínas que ya no se necesitan, o que están dañadas, o bien ayudan en ladigestión de los alimentos. Estas enzimas son monoméricas, de bajo peso molecular (de 15,000 a 35,000) y pueden clasificarse convenientemente según sus actividades y grupos funcionales enendopeptidasas y exopeptidasas. Las endopeptidasas son proteasas que cortan enlaces peptídico en la parte interna de la cadena polipeptidica y comprende a la Serina-proteasa, Tiol proteasa (por ejemplo, papaína,ficina, bromelina), Proteasas ácidas (por ejemplo, pepsina, quimiopepsina, catepsina-D). Las exopeptidasas son proteasas que cortan enlaces peptídicos terminales y comprende las carboxipeptidasas.Las proteasas son de gran importancia a nivel industrial pues se emplean en diferentes procesos, como por ejemplo la clarificación de algunas bebidas, como ablandadores de carnes y en la formulaciónde detergentes. Se comercializan en forma de polvo liofilizado o en líquido. En este contexto, el aislamiento de bacterias productoras de estas enzimas reviste una importancia particular.
 Metodología
Requerimientos
Leche descremada en polvo 28 g/L
Peptona de caseína 5 g/L M
Extracto de levadura 2.5 g/L
Dextrosa 1 g/L
Agar 15 g/L
pH final...