aislamiento de DNA genomico

Universidad del Bíobío
Facultad de Educación y Humanidades
Pedagogía en Ciencias Naturales


ANTECEDENTES DE AISLAMIENTO Y PURIFICACIÓN DE DNA GENÓMICO
BIOLOGÍACELULAR Y MOLECULAR




Integrantes:
Daniela inostroza
Profesora:
Srta. Michelle Muñoz




INTRODUCCIÓN
El DNA es una molécula que se encuentra presente en todas las células de losseres vivos y es la encargada de codificar desde nuestras características físicas visibles hasta las proteínas presentes en nuestro organismo. La molécula de DNA está formada por dos hebras enrolladas entorno a un eje hacia la derecha formando una hélice. Estas hebras se mantienen unidas por puentes de hidrógeno que se establecen entre sus bases nitrogenadas (A-T y C-G).
La proteinasa K es unaenzima encargada de degradar las proteínas de membranas celulares, por ello se le utilizará en esta ocasión puesto que estará encargada de romper las membranas y degradar proteínas.
En el presentelaboratorio de Biología Celular y molecular, llevaremos a cabo una extracción de DNA de frambuesa a través de un Buffer de Lisis, en donde lo primero que deberemos realizar será romper las células y aislarel DNA de la presencia de lípidos y proteínas.



OBJETIVOS
 Extraer DNA de una muestra de tejido de Frambuesa
 Observar las características de cada proceso a realizar.


METODOLOGÍA
 Unavez preparado en Buffer de Lisis ( 50 mM Tris-HCL, pH 8.0, 50 mM EDTA, 1% SDS y 10 mM NaCl), agitamos la muestra y agregamos 10 ul de proteinasa K.
 Luego adicionamos 100 ul 3M de acetato de Potasiocon pH 4.0, 440 ul de Fenol saturado en Tris pH 8.0 y 440 ul de Cloroformo.
 Posteriormente la muestra se centrifuga durante unos 15 minutos aproximadamente a 15000 rpm para luego sacar elsobrenadante.
 Repetimos el proceso con Fenol saturado y añadimos Cloroformo al sobrenadante ya extraído.
 A continuación se transfiere la fase acuosa y agregamos Etanol para que precipite el DNA y...