Aislamiento De Dna

Laboratorio de Biología molecular de la célula

Práctica
AISLAMIENTO DE DNA

AISLAMIENTO DE DNA
INTRODUCCIÓN
El ADN es una de las partes fundamentales de los cromosomas, son estructuras constituidas por dos pequeños filamentos o brazos, que pueden ser iguales o desiguales, están unidos por un punto común llamado Centrómero; varían en forma y tamaño, pueden verse fácilmente al momento de ladivisión celular por medio de un microscopio.
Los cromosomas químicamente están formados por proteínas y por el Ácido Desoxiribonucleico o ADN.
Estructura del ADN
El ADN está formado por unidades llamadas nucleótidos, cada una de las cuales tiene tres moléculas: el ácido fosfórico, un azúcar de cinco carbonos llamado desoxiribosa y una base nitrogenada.
El ácido fosfórico forma el grupofosfato; la base nitrogenada es de cuatro clases: adenina (A), guanina (G), citocina (C) y timina (T).
Según James Watson y Francis Crick, quienes publicaron por primera vez la estructura del ADN, notaron que está formado por una doble cadena de nucleótidos que forman una especie de doble hélice semejante a una escalera en espiral; a los lados se disponen en forma alternada un fosfato y un azúcar y enlos peldaños dos bases nitrogenadas.
Funciones y Propiedades del ADN
a) El ADN controla la actividad de la célula.
b) Es el que lleva la información genética de la célula, ya que las unidades de ADN, llamadas genes, son las responsables de las características estructurales y de la transmisión de estas características de una célula a otra en la división celular. Los genes se localizan a lolargo del cromosoma.
c) El ADN tiene la propiedad de duplicarse durante la división celular para formar dos moléculas idénticas, para lo cual necesita que en el núcleo existan nucleótidos, energía y enzimas. (Bolívar S. et al. 1989)
MATERIAL
*
* 1 microscopio
* 1 mortero con pistilo
* 1 gradilla para tubos de ensayo
* 4 tubos de ensayo
* 1 varilla de vidrio
* 5cubreobjetos
* 5 portaobjetos
* 3 vasos de precipitado de 500 ml
* 3 varillas de vidrio
* 1 balanza analítica
* 1 micropipeta de 1000 ul con puntas
* 1 timer

MATERIAL BIOLOGICO
* Ablandador para carnes
* Espinacas
* Hígado de pollo
* Cebollas
* Brócoli
* Chicharos
REACTIVOS
* Alcohol isopropilico al 70-90%
* Detergente líquido
* Cloruro desodio
* Azul de metileno
* Agua destilada

METODOLOGIA
RESULTADOS
Después de hacer el homogeneizado, obtuvimos un volumen de alrededor de 500 ml color verde traslucido con pedazos sólidos de chicharos.
Al verter el alcohol sobre los 20 ml finales que utilizamos, poco a poco fueron desprendiéndose hebras blancas, correspondientes a las hebras de DNA.
Hebras de DNA suspendidas en etanol.Segunda preparación. Hebras de DNA de células vegetales (40X)
Hicimos nuestra primera preparación, desafortunadamente no resulto y no obtuvimos una imagen clara de las hebras al observar al microscopio. En una segunda preparación, obtuvimos una imagen más clara.
ANALISIS DE LOS RESULTADOS
La composición de la célula es muy compleja, pero gracias a la presencia de moléculas como enzimaslogramos exponer su material genético. Es importante mencionar que en todas las muestras que se obtuvieron en el laboratorio se observaron las mismas hebras de DNA solo que en algunos casos se veían con mayor claridad que en otros debido a la cantidad de enzimas utilizadas para romper las proteínas y por el cuidado que se tuvo con la muestra, y claro, sin dejar de considerar las propiedades intrínsecasde cada uno de los materiales biológicos utilizados.
La primera muestra no nos resulto al aplicar el ablandador de carnes, debido al mal manejo del material en este paso y es por eso que se rompió nuestro DNA, imposibilitándonos verlo.
DISCUSIÓN
1. Cuál es la diferencia entre las distintas muestras biológicas?
Nosotros utilizamos chicharos, pero si utilizáramos cualquier otra material...