aislamiento de enzimas
Páginas: 4 (788 palabras)
Publicado: 13 de mayo de 2013
Práctica 10
Aislamiento de Enzimas
Objetivo
Identificar la producción de amilasa en colonias bacterianas.
Fundamento
En los animales, la digestión del almidón y del glucógeno comienza en laboca, con la acción de la -amilasa que se secreta en la saliva. Esta enzima rompe los enlaces internos (1→4) de ambos polímeros. En el intestino, la digestión continúa, facilitada por la -amilasasecretada por el páncreas. Esta enzima degrada la amilosa a maltosa y un poco de glucosa. Sin embargo, sólo degrada parcialmente la amilopectina y el glucógeno porque no es capaz de romper los enlaces(1→6).
La -amilasa es una endoenzima que se denomina de esta forma porque todos los productos de hidrólisis tienen una configuración en el carbono 1 de la unidad de la glucosa reductora. La-amilasa reduce rápidamente la capacidad que tiene la amilosa de teñirse de color violeta con yodo y hace disminuir la viscosidad de las soluciones de almidón.
La detección de amilasa producida porbacterias, tiene como base la facultad de estas enzimas de hidrolizar el almidón, lo cual se puede confirmar demostrando la desaparición del mismo en los medios de cultivo mediante la prueba cualitativapara el almidón que consiste en la aparición de color violeta al adicionar una solución de yodo. Cuando el almidón es hidrolizado, los productos obtenidos como dextrinas, maltosa y glucosa noproducen color violeta con el yodo.
Como se mencionó, donde hay hidrólisis del almidón desaparece el color violeta característico del complejo yodo-almidón. La hidrólisis del almidón alcanza ciertadistancia de las colonias bacterianas debido a la producción de amilasa extracelular que difunde en el medio.
Procedimiento
En Placa
A partir de un cultivo puro de Bacillus subtilis inocular porestría en medio de agar almidón un campo de la caja petri, procurando que las estrías no toquen los bordes de la caja, esto con la finalidad de que se tenga una zona libre de inoculo la cual sirva de...
Aislamiento de Enzimas
Objetivo
Identificar la producción de amilasa en colonias bacterianas.
Fundamento
En los animales, la digestión del almidón y del glucógeno comienza en laboca, con la acción de la -amilasa que se secreta en la saliva. Esta enzima rompe los enlaces internos (1→4) de ambos polímeros. En el intestino, la digestión continúa, facilitada por la -amilasasecretada por el páncreas. Esta enzima degrada la amilosa a maltosa y un poco de glucosa. Sin embargo, sólo degrada parcialmente la amilopectina y el glucógeno porque no es capaz de romper los enlaces(1→6).
La -amilasa es una endoenzima que se denomina de esta forma porque todos los productos de hidrólisis tienen una configuración en el carbono 1 de la unidad de la glucosa reductora. La-amilasa reduce rápidamente la capacidad que tiene la amilosa de teñirse de color violeta con yodo y hace disminuir la viscosidad de las soluciones de almidón.
La detección de amilasa producida porbacterias, tiene como base la facultad de estas enzimas de hidrolizar el almidón, lo cual se puede confirmar demostrando la desaparición del mismo en los medios de cultivo mediante la prueba cualitativapara el almidón que consiste en la aparición de color violeta al adicionar una solución de yodo. Cuando el almidón es hidrolizado, los productos obtenidos como dextrinas, maltosa y glucosa noproducen color violeta con el yodo.
Como se mencionó, donde hay hidrólisis del almidón desaparece el color violeta característico del complejo yodo-almidón. La hidrólisis del almidón alcanza ciertadistancia de las colonias bacterianas debido a la producción de amilasa extracelular que difunde en el medio.
Procedimiento
En Placa
A partir de un cultivo puro de Bacillus subtilis inocular porestría en medio de agar almidón un campo de la caja petri, procurando que las estrías no toquen los bordes de la caja, esto con la finalidad de que se tenga una zona libre de inoculo la cual sirva de...
Leer documento completo
Regístrate para leer el documento completo.