Aislamiento de glucógeno

PRACTICA: AISLAMIENTO DE GLUCÓGENO EN TEJIDO ANIMAL
PROCEDIMIENTO
1. Aislamiento del Glucógeno

I. Resultados
Se obtuvo un precipitado de color gris y cuando se disolvió en agua tomó uncolor canela como se muestra en la imagen. Esta disolución líquida contiene glucógeno unido a proteínas (glucogenina) que han resistido a todo el procedimiento.
II. Discusión
El glucógeno es unpolisacárido que se almacena en los tejidos animales y sirve de reserva energética para que en situaciones de ayuno se movilice para mantener la glucemia. Lo podemos encontrar principalmente hasta enun 10 % en el hígado y en 1% en el músculo de su peso húmedo.
Para aislar el glucógeno del tejido animal en esta práctica se usó hígado de pollo. El hígado como ya se mencionó contiene un mayorporcentaje de glucógeno de reserva. Se extrajo 1 g de hígado y se trituró en un mortero frío con 2 mL de NaCl 0,9%. Esta sal brinda un medio isotónico para homogenizar la muestra y obtener una disoluciónlíquida con la que se puede trabajar fácilmente en el laboratorio.
Se extrae 2 mL de esta disolución y se coloca en un tubo con tapa en donde se agrega 4 mL KOH 30% y se ubica en baño María hirvientedurante 20 minutos. El hidróxido de potasio al calentarlo en agua hirviendo alcaliniza el medio ya que es una base fuerte. El glucógeno es estable en este medio en comparación a los demás componentesque se hidrolizan. Se procede a centrifugar por 5 minutos a 3000 rpm para precipitar el tejido fibroso no digerido y dejar en el sobrenadante el glucógeno más las proteínas solubles en medio alcalino.Aún no se tiene glucógeno concentrado, así que se procede a extraer cuidadosamente 2 mL del sobrenadante que contiene polisacáridos, monosacáridos solubles en medio alcalino. Este procedimiento sehace con una pipeta pasteur que ya viene graduada a 1 mL. Se le añade 0,4 mL de Na2SO4 15% y 6 mL de alcohol etílico 96º. El etanol hace precipitar polisacáridos y monosacáridos solubles en el...