Aislamiento e identificaci n de bacterias cido l cticas

"Isolation and identification of lactic acid bacteria from human milk with potential probiotic role"

Cobián García A., Cavazos-Garduño A., Reynoso-González O., Solís-Pacheco J., Serrano-Niño J., Aguilar-Uscanga B.

Centro Universitario de Ciencias Exactas e Ingeniería. Universidad de Guadalajara, Jalisco, México. Boulevard Marcelino García Barragán #1421, Col. Olímpica. Guadalajara, JaliscoC.P. 44430 México.

RESUMEN.

En los últimos años se ha observado un creciente interés, tanto por parte de la comunidad científica como de la población general, hacia el papel que los probióticos pueden desempeñar en el mantenimiento de la salud y en la prevención y tratamiento de distintas enfermedades. Por ello surge en el campo de la investigación, el interés de estudiar los posiblesmicrorganismos con potencial probióticos que puedan ser utilizados para la industria farmacéutica y de alimentos. Por tal motivo, este trabajo tuvo por objetivo aislar e identificar molecularmente bacterias de calostro humano y leche madura humana, con la finalidad de encontrar probióticos de interés industrial. Para ello se realizaron una serie de pruebas para evaluar la capacidad de sobrevivencia de lasbacterias identificadas como posibles probióticos, simulando las condiciones de estrés gastrointestinal, como: resistencia al pH, sales biliares, enzimas (proteínasa, tripsina, y α-amilasa), hidrofobicidad, capacidad de autoagregación, así como su potencial antimicrobiano y determinación de la producción de ácidos orgánicos por cromatografía de líquidos. Los resultados del aislamiento mostraron queen calostro humano, no se encontraron bacterias con potencial probiótico, ya que de las 3 muestras diferentes analizadas, se aisló solo una cepa identificada molecularmente como Staphylococcus epidermidis, la cual dio positivo en las pruebas de patogénicidad. Por el contrario, en la leche madura se lograron aislar 5 cepas de bacilos, estas cepas fueron identificadas molecularmente, en género yespecie, correspondiendo a: Lactobacillus fermentum, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Leuconostoc mesenteroides, Bacillus subtilis, Streptococcus salivarius. De estas cepas, L. fermentum, L. delbrueckii subsp. bulgaricus, y L. mesenteroides, mostraron una sobrevivencia de 108 UFC a pH bajos (pH2-pH3) y a concentraciones de sales biliares de (0.2% y 0.4%), así como también unahidrofobicidad de hasta 82.9%. Por otra parte, estas cepas inhibieron el crecimiento de las bacterias Escherichia coli y Salmonella thipymurium, esto pudo deberse a la producción de ácidos orgánicos lo cual se midió por cromatografía de líquidos, encontrándose principalmente ácido láctico, acético y butírico, o debido a la presencia de una bacteriocina, lo cual se evaluara en un posterior trabajo.Finalmente, estas cepas reunieron algunas de las características in vitro necesarias para ser consideradas como probiótico, sin embargo, debido a que solo fue una caracterización parcial, estas podrían ser consideradas como potenciales probióticos.

INTRODUCCION.

La leche humana se reconoce como el estándar de oro de la alimentación infantil debido a sus componentes nutricionales y biológicos que danmúltiples beneficios en el binomio madre-hijo, incluidos los componentes bioactivos que salvanguardan el crecimiento y desarrollo del recién nacido (Sherman et al., 2004).
Este fluido va cambiando su composición química desde el preparto: calostro, leche de transición , leche madura, por lo que es un hecho aceptado universalmente que la leche humana debe constituir el único alimento que el niño recibadurante los primeros meses de vida (Durán et al., 2001).
La evidencia científica que avala el estudio realizado por Lozano (et al., 2003), demuestra que la leche humana no es una simple colección de nutrientes si no un producto vivo con gran complejidad biológica. Por ello desde el siglo XIX se han realizado importantes descubrimientos de numerosos científicos, microbiólogos, que permitieron un...