aislamiento e identificacion de Staphylococus

Objetivo.
Aislar e identificar bacterias presentes en muestras de la cavidad nasofaríngea y de garganta, así como de leche de vaca enferma de mastitis.
Introducción.
Los estafilococos
Son cocos anaerobios facultativos, Gram positivos y se presentan solos, en pares o racimos, no son móviles ni esporulados; algunos biotipos son capaces de producir una toxina altamente termoestable, porejemplo, Staphylococcus aureus produce 5 toxinas, que pueden provocar severas intoxicaciones en el hombre.
Su metabolismo es oxidativo/fermentativo, es catalasa-positivo y puede metabolizar una gran variedad de carbohidratos en condiciones aeróbicas, con la subsecuente liberación de ácido, principalmente ácido acético con pequeñas cantidades de bióxido de carbono; en condiciones anaerobias, el productoprincipal de la fermentación es el ácido láctico.
Las tres condiciones necesarias para su óptimo desarrollo son: pH cercano a la neutralidad, temperatura alrededor de 30ºC y ausencia de microorganismos competitivos. Este último punto es importante, ya que Staphylococcus aureus no es competitivo en presencia de otros microorganismos.







En los humanos, las cepas de Staphylococcus habitan enforma específica en el tracto nasofaríngeo, cabello y piel del 50% o más de los individuos, sin causar daño aparente (portadores asintomáticos), pudiendo transferirse de los dedos y manos a los alimentos y desarrollarse con rapidez en ellos.










El término Staphylococcus coagulasa positivo se utiliza para describir aquellas cepas que secretan una enzima que provoca coagulación delfibrinógeno sanguíneo, utilizando el microorganismo esta capacidad contra la fagocitosis y otros mecanismos de defensa del huésped. Esta reacción se utiliza in vitro para la identificación de cepas de Staphylococcus productoras de toxinas, mediante el uso de plasma.
Aislamiento y diferenciación preliminar de los estafilococos y de los cocos gram positivos relacionados
Frotis directos con tinción de gramEn frotis directos teñidos con Gram a partir de muestras clínicas, los estafilococos aparecen como cocos gram (positivos) o gram variables con diámetros que van desde 0,5 hasta casi 1,5 (im).Los microorganismos pueden aparecer solos, en pares, en cadenas cortas o en grupos, tanto dentro como fuera de los leucocitos polimorfonucleares (PMN). Las variaciones en el tamaño celular y en la tinción deGram se deben probablemente a la acción de las células inflamatorias y a sus enzimas hidrolíticas en las células bacterianas. En los frotis directos, los pares o cadenas cortas de microorganismos no pueden diferenciarse de estreptococos, micrococos o peptoestreptococos, aunque los estreptococos suelen aparecer como cadenas o diplococos más que como cadenas de células individuales aisladas.Morfología de la colonia
Las colonias de algunas cepas de S. aureus son por lo general grandes (4-6 mm de diámetro), lisas, enteras y de consistencia cremosa, aunque ciertas cepas pueden ser de apariencia húmeda o “viscosas”. Algunas cepas pueden estar pigmentadas de amarillo o de amarillo naranja (de ahí el nombre “aureus” que significa “color oro”), mientras que otras pueden producir coloniasblanquecinas o grises. Las últimas cepas se pueden asemejar a los estreptococos del grupo D y a los enterococos. La producción de pigmento en S. aureus y entre los estafilococos coagulasa negativos por lo general se vuelve más pronunciada después de la incubación a temperatura ambiente durante 2 a 3 días. Algunas de las especies de S. aureus y de las especies coagulasa negativas pueden tener una zonadifusa de β-hemólisis alrededor de las colonias; esta propiedad hemolítica puede evidenciarse sólo después de una incubación prolongada.
Los micrococos y las especies relacionadas crecen casi siempre más lentamente; a menudo requieren 48 horas de incubación antes de que se pueda distinguir la morfología típica de la colonia. Después de ese tiempo las colonias de los micrococos miden 1 a 2 mm de...