Aislamiento y caracterizaci n de una lipasa term fila de thermoleovorans Bacillus ID

Aislamiento y caracterización de una lipasa termófila de thermoleovorans Bacillus ID-1
Dong -Woo Sotavento una , Usted -Seok Koh b , Ki- junio Kim b , Byung -Chan Kim una , Jong Hak- Choi una , Doo- Sik Kim b , Maggy T. Suhartono c , Yu- Ryang Pyun una , *
  una Departamento de Biotecnología, Centro de Bioproductos Reasearch , Universidad de Yonsei , 134 Shinchon -Dong, Sudaemoon -Gu , Seúl120-749 , Corea del Sur   b Departamento de Bioquímica , Bioproducts Reasearch Center, Universidad de Yonsei , Seúl 120-749 , Corea del Sur   c Centro Interuniversitario de Biotecnología , Universidad Agrícola de Bogor , Bogor , Indonesia
  *Autor correspondiente . Tel . : +82 (2) 361-2883 Fax: +82 (2) 312-6821 , E -mail: yrpyun@bubble.yonsei.ac.kr
Copyright 1999 Federation of EuropeanMicrobiological Societies
PALABRAS CLAVE
• • La lipasa Termófilo thermoleovorans Bacillus
RESUMEN






Un microorganismo termofílico, thermoleovorans Bacillus ID-1 , aislado de fuentes termales en Indonesia, mostraron actividad de la lipasa extracelular y las altas tasas de crecimiento sobre sustratos de lípidos en las temperaturas elevadas . El aceite de oliva (1,5 % w / v) como única fuente de carbono ,el aislamiento ID-1 creció muy rápidamente a 65 ° C con su tasa de crecimiento específico (2,50 h-1) Y su actividad de la lipasa alcanzado el valor máximo de 520 l U-1 durante la fase exponencial tardía y disminuyeron después . Además de esto , aislar ID-1 podrían crecer en una variedad de sustratos lípidos del petróleo, como aceites ( aceite de oliva, aceite de soja y mineral) , triglicéridos (trioleína , tributirina ) y emulsionantes ( Tween 20 , 40) . La lipasa elimina de ID-1 fue purificada 223 veces a la homogeneidad por la precipitación con sulfato de amonio , DEAE- Sephacel cromatografía de intercambio iónico y Sephacryl S -200 cromatografía de filtración de gel. Como resultado , la masa molecular relativa de la lipasa se determinó que 34 kDa de sodio dodecil sulfato deelectroforesis en gel de poliacrilamida (SDS- PAGE). La enzima mostró actividad óptima a 70-75 ° C y 7,5 de pH y exhibió el 50% de su actividad original después de una incubación de 1 h a 60 ° C y 30 min a 70 ° C y su función catalítica fue activada en presencia de Ca2 + o Zn2 +.

Recibido el 28 de mayo de 1999, revisados el 24 de agosto de 1999, aceptado 25 de agosto 1999
DIGITAL identificador de objetos (DOI)
10.1111/j.1574-6968.1999.tb08754.x Acerca de DOI
 
 
 
1Introducción






Las lipasas ( triacilglicerol acylhydrolases ; CE 3.1.1.3) cataliza la hidrólisis de los triglicéridos en la interfaz aceite-agua [1 ]. lipasas microbianas han recibido considerable atención en la actualidad en lo que respecta a las aplicaciones biotecnológicas para detergentes , transesterificación y síntesis decompuestos quirales [2 ]. En particular , las lipasas de termófilos se espera que desempeñen un papel significativo en los procesos industriales , ya que son termoestables y resistentes a la desnaturalización química.
Hay algunos tipos de grasas con puntos de fusión más de temperatura ambiente. Estos a menudo dificulta la catálisis enzimática , por lo que no es eficiente para utilizar las enzimas apartir de fuentes mesófilos . En lo que respecta al tratamiento enzimático de los lípidos y los efluentes industriales ricos en petróleo a altas temperaturas , las lipasas termoestables de cepas de bacterias termófilas son necesarias y lipasa producir cepas de bacterias termófilas también se puede utilizar para desarrollar el proceso de hidrólisis de los lípidos. Recientemente, varias lipasas sehan purificado y caracterizado a partir de cepas termófilas , principalmente Bacilo[3-5 ]. Las tasas de crecimiento y las actividades de la lipasa de termófilo Bacilo cepas en medios con sustratos de lípidos, sin embargo, son relativamente bajos en comparación con los de las bacterias mesófilas . Así , se examinaron y aisladas una novela termófilo Bacilo cepa que produzca la lipasa termoestable de...