aislamiento y caracterizacion de un bacteriofago y su uso terapéutico

Introducción
Visón
• Mamífero carnívoro

• Norte de EUA,
Europa y Asia
• 50 millones de
pieles al año
mundialmente

€ 2 000

Problemática

50%
Mortalidad
Neumonía
hemorrágicaResistencia
antibióticos

P.
aeruginosa

Características esenciales del
bacteriófago
Especifico
Solo
la
bacteria
de interés

Ubicuo
Se
encuentran
en
cualquier
parte

Inocuo
Nodebe
tener
genes de
virulencia

Dosis
única
Replicació
n
exponenci
al

Lítico
Debe
lisar
la
bacteria

Estrategia experimental
Aislamiento
Patógeno

Caracterizac
ión
Rango deHospedero
Curva de
Replicación
Secuenciación
Morfología
Inhibición in vitro
Microscopía
Fagoterapia
electrónica
transmisión

Aislamiento
Bacteriófagos

0
6

0
1

0
2Identificación
Secuenciación
de 16S rDNA

Resistencia

0
5

0
4

0
3

Antibióticos

Resultados
1

Aislamient
o
patógenos

• Se aislaron 5 cepas de
bacterias

2
Identificación
• 98% deidentidad con P.
Secuenciación aeruginosa
de16s rDNA
3

Resistencia • Menor susceptibilidad
antibiótico
que en aislamientos
s
anteriores

Resultados
4

Aislamiento •
El fago aisladofue
bacteriófag
llamado PPA-ABTNL
o

5 Morfología

Microscopia
electronica
de
transmisión

• Cabeza
icosaedrica
de aproximadamente
40nm
• Cola
de
aproximadamente
15nm de longitudConclusión
Los fagos que se utilizaron lograron tener un
potencial de infectividad alto al reducir
significativamente
el
crecimiento
de
P.
aeruginosa en ensayos in vitro , así como en
losensayos in vivo donde se encontró que la
tasa mortalidad en ratones y en visones
disminuye considerablemente.

GRACIASGRACIAS!!

Materiales y metodos
Aislamiento de p.
aeruginosa
5
muestrasde
pulmón

100 ml al
caldo de
bilis
lactosa

Se
homogenizaron
en tampón PBS.

Recuperación
de colonias

Incubación a
37˚ por 24
hrs.

Se sembró en
luria bertani

Siembr
a en...