Aislamiento y Prepurificación De Los Compuestos Activos Presentes En El Veneno De Pelagia Noctiluca (Scyphozoa: Pelagiidae) Del Mar Caribe

Ciencias Marinas (2011), 37(3): 369–377

Isolation and prepurification of active compounds in venom from Pelagia noctiluca (Scyphozoa: Pelagiidae) from the Caribbean Sea Aislamiento y prepurificación de los compuestos activos presentes en el veneno de Pelagia noctiluca (Scyphozoa: Pelagiidae) del Mar Caribe
J Sánchez-Rodríguez*, NL Lucio-Martínez Unidad Académica de Sistemas Arrecifales,Instituto de Ciencias del Mar y Limnología, Universidad Nacional Autónoma de México, Prolongación Niños Héroes s/n, Domicilio conocido, Puerto Morelos CP 77580, Quintana Roo, México. * Corresponding author. E-mail: judithsa@cmarl.unam.mx

C M

ABSTRACT. Crude extract from Pelagia noctiluca was purified using liquid chromatography. The isolated fractions were tested in sea crabs
(Ocypode quadrata)and neurotoxic activity was observed. The protein content of the crude extract, quantified by the Bradford method, was 0.25 mg mL–1. Polyacrylamide gel electrophoresis was used to determine the apparent molecular weight of the different fractions of the crude extract, and several bands were identified: 34, 48, and between 90 and 200 kDa. Haemolytic activity in human blood type A+ was 100% with 1.1g mL–1 and 50% with 0.98 g mL–1 of crude extract. The crude extract was observed under a microscope and three types of nematocysts were found: heterotrichous microbasic eurytele, heterotrichous isorhiza, and holotrichous isorhiza. Key words: isolation, Pelagia nuctiluca, venom, Caribbean Sea.

RESUMEN. El extracto crudo de Pelagia noctiluca fue purificado mediante cromatografía de líquidos.Las fracciones aisladas se probaron en cangrejos de mar (Ocypode quadrata) y se observó la presencia de actividad neurotóxica. El contenido de proteína, cuantificada mediante el método de Bradford, en el extracto crudo fue 0.25 mg mL–1. La técnica de electroforesis en gel de poliacrilamida se empleó para determinar el peso molecular aparente de las diferentes fracciones del extracto crudo, y seidentificaron varias bandas: 34, 48 y de 90 a 200 kDa. La unidad hemolítica en eritrocitos humanos del tipo A+ fue 100% con 1.1 g mL–1 y 50% con 0.98 g mL–1 del extracto crudo. El extracto crudo se observó bajo el microscopio y se encontraron tres tipos de nematocistos: heterotrico microbásico euritele, heterotrico isorriza y holotrico isorriza.
Palabras clave: aislamiento, Pelagia noctiluca,veneno, Mar Caribe.

INTRODUCTION
Cnidarians are the largest phylum of generally toxic animals; however, their toxins and venoms have not received as much attention from scientists as those of terrestrial organisms (e.g., snakes, scorpions, spiders) or other marine organisms (e.g., cone snails) (Turk and Kem 2009). This phylum provides a large number of natural products, including proteins andsecondary metabolites with either toxic or biomedical properties (see Rojas et al. 2002 and references therein). Chemical, biochemical, and pharmacological investigations of this phylum have mainly focused on members of the classes Alcyonaria (soft corals and gorgonians), Zooantharia (anemones), and Cubozoa (jellyfishes) (Rojas et al. 2002). This phylum is characterized by the presence of nematocysts,which are the secretions of specialized cells that reside mainly in the tentacles of jellyfish, sea anemones, corals, and the polyps of hydroids. The main functions of nematocysts are to obtain food, to defend against predators, and to adhere to solid substrates during locomotion
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INTRODUCCIÓN
Los cnidarios son el filo más grande de animales tóxicos; sin embargo, sus toxinas y venenos nohan llamado tanto la atención de los científicos como lo han hecho los de organismos terrestres (e.g., serpientes, escorpiones, arañas) u otros organismos marinos (e.g., Conus sp.) (Turk y Kem 2009). Este filo provee un gran número de productos naturales, entre los que se incluyen proteínas y metabolitos secundarios con propiedades tóxicas o biomédicas (ver Rojas et al. 2002 y sus referencias)....