algas













CULTIVO DE MICROALGAS
AISLAMIENTO DE UNA CEPA A PARTIR DE UN CULTIVO MIXTO





LABORATORIO CULTIVO DE ALGAS

Cristopher Campos Talandianos; Daniel Puldón Álvarez
Ingeniería en Acuicultura
Unab


Prof: Alejandra Núñez; Ana María Mora; Cristian Bulboa
Cultivo de Algas
Unab
















24 junio 2013


INTRODUCCIÓN
Son llamadasmicroalgas a una gran cantidad de especies que constituyen el fitoplancton abarcando desde organismos autótrofos hasta microflagelados y microciliados autótrofos, pudiéndose encontrar también, una serie de microorganismos mixotróficos, los cuales facultativamente o exclusivamente, pueden captar los nutrientes carbonados directamente desde el medio donde se estén cultivando. En condiciones de cultivoartificiales, el medio de cultivo representa uno de los factores más importantes para asegurar un óptimo crecimiento de la especie que se desea cultivar. Es por aquella razón que los medios de cultivos utilizados, deben proporcionarle a las microalgas los nutrientes requeridos y las condiciones fisicoquímicas favorables, de manera que estos sean debidamente aprovechados (Chinchayán. 1996).Las microalgas organismos que ocupan el primer eslabon en la cadena trofica, han recibido mucha atención durante los ultimos años, especialmente en las regiones tropicales y subtropicales, en donde se emplean como un biosistemas alternativo para la remocion de nutrientes de este tipo de aguas. Estos microorganismos incorporan nitrogeno en forma de amonio que es utilizado para formar aminoácidos;aunque tienen la capacidad de incorporarlo en forma de nitrato (Contreras, 1994; de la Noüe et al., 1992; Jeanfils et al., 1993).
En cuanto al cultivo in vitro en laboratorio los recipientes de cultivo más comúnmente usados son de materiales no tóxicos como las cajas de Petri, matraces Erlenmeyer, matraces Ferenback, carboys o garrafas, etc.
Se han desarrollado diferentes medios para elcultivo de microalgas que van desde las fórmulas para enriquecer el agua de mar natural, hasta el uso de medios artificiales que permitan resultados constantes en contraste con los resultados tan variables que brinda el uso del agua de mar natural que entre otros factores depende del lugar donde se colecta ésta, y el tiempo de almacenamiento de la misma (FAO, 2003).
Los medios artificiales se usanprincipalmente para fines experimentales, ya que como se ha mencionado, brinda resultados constantes, aunque existen algunas especies que no crecen en medios artificiales por factores desconocidos que afectan su crecimiento, las principales fórmulas utilizadas van desde el agua de Miguel, que data de 1910, desarrollada por Allen-Nelson; el medio de End-Schereiber de 1934, hasta fórmulasespecíficas para familias como la fórmula del Laboratorio Haskins de Nueva York para diatomeas, Provasoli et al., 1975; Matthiesen & Thorner, 1966; McIachlan, 1973; Guillard F., 1973; Droop, 1975, 1979; Schoene, 1982, etc.
Objetivo general
Aislamiento de una cepa unialgal a partir de un cultivo mixto.
Objetivos específicos
-Preparación de medios de cultivos (Guillar F/2, Erd-Schreiber y Bristol)-Realizar diluciones seriadas
-Realizar ailamiento




METODOLOGÍA
Preparación de medio de cultivo
Medio Guillar “F/2”
MEDIO DE GUILLAR “F/2” (J. STEIN, 1979)
Nutrientes Mayores
Solución Primaria
NaNo3
7.5
% w/v
NaH2PO4.H2O
0.5
% w/v
NH4Cl
2.65
% w/v
Na2SIO3.9N2O
3
% w/v (calentar para disolver)
Posteriormente se usó un mililitro de estas soluciones por litro de agua de mar, parapreparar el medio “F/2”.
Metales Traza
Solución Primaria
CuSO4.5H2O
0.98
% w/v
ZnSO4.7H2O
2.2
% w/v
ZnCl2
1.05
% w/v
CoCl2.6H2O
1.0
% w/v
MnCl2.4H2O
18
% w/v
Na2MnO4.2H2O
0.63
% w/v

Solución Primaria de Metales Traza

Se disolvió 3.15 g de FeCl.6H2O ó 4.36 de EDTA (Na2) en 900 ml de agua destilada, agregando 1 ml de cada una de las soluciones stock primarias de metales...