Algunas GUIAS
Páginas: 29 (7177 palabras)
Publicado: 2 de abril de 2014
EXTRACCIÓN DE ADN EN TEJIDOS VEGETALES
PROTOCOLO DE SHAWN CARLSON
INTRODUCCIÓN
Con el desarrollo de esta práctica usted conocerá una técnica sencilla para extraer ADN, en la primera parte del laboratorio se desarrollará la metodología establecida, recuerde tomar datos cuantitativos exactos acerca del proceso, así como asegurarse de establecer el método adecuado para recopilar datos. En lasegunda parte usted podrá aplicar la técnica de extracción de ADN para establecer un experimento que le permita conocer datos con relación a una o más especies vegetales, es decir deberá aplicar el método aprendido en la comprobación de una hipótesis creada por usted con relación a cualquier especie vegetal.
MATERIALES.
DE USO COMÚN: Agua mineral, sal, bicarbonato, champú, fruta o verdura,isopropanol (frío), azul de metileno, vasos de precipitados grandes (250 ml), centrífuga, probeta (500 ml), matraces (500 ml), pipeta (5 ml).
PARA CADA GRUPO:
1 tubo de ensayo grande.
2 tubos de ensayo pequeños (para centrífuga).
1 vaso de precipitados pequeño.
1 varilla de vidrio.
1 pipeta PaSteur.
METODOLOGÍA
Preparación del tampón.
Elaborar lasiguiente mezcla: 240 ml agua mineral + 3 g de sal + 10 g de bicarbonato + 10 ml de champú. Enfríar a 0º C.
Preparación del material biológico.
La trituración del material biológico, mejor en frío. Se trocean las verduras, se les añade un poco de agua y a continuación se trituran.
Se toman 5 ml del triturado y se depositan en el tubo de ensayo grande. A continuación se le añaden 10 ml deltampón frío. Se agita VIGOROSAMENTE durante 2 minutos.
Centrifugación 5’.
El contenido del tubo de ensayo se separa en los dos tubos de ensayo pequeños, de manera que los dos tengan la misma masa. A continuación estos tubos se ponen en la centrífuga durante 5 min. Tras la centrifugación se recoge el sobrenadante (con cuidado de no coger el precipitado) de cada uno de los tubos de ensayo; para ellonos ayudamos de una pipeta Pasteur. Este sobrenadante se coloca en el vaso de precipitados pequeño.
Añadir 10 ml de isopropanol frío.
Se añade al vaso de precipitados sobre la muestra con mucho cuidado: para ello se va dejando caer el isopropanol sobre las paredes del vaso de precipitados.
Tras añadir el isopropanol en la muestra han quedado dos fases, una superior (contiene elisopropanol) y otra inferior. Se introduce la varilla de vidrio en la interfase entre el isopropanol y el resto de la muestra y se va moviendo la varilla con cuidado de uno a otro lado durante 1 min. Entonces se saca la varilla y en ella estará adherido el ADN.
Añadir una gota de azul de metileno al tubo de ensayo.
El método que hemos utilizado para extraer al ADN no es todo lo eficiente que sequisiera, con lo que en la muestra todavía queda ADN sin extraer. Al añadir el azul de metileno, en la interfase, se teñirán las fibras de ADN que no se han conseguido extraer.
REPRODUCCIÓN ASEXUAL
OBJETIVOS
Diferenciar las clases de reproducción asexual.
Observar las estructuras productoras de esporas en plantas y hongos.
Observar la gemación de las levaduras.
Aprender a realizar montajesde hongos.
INTRODUCCIÓN
La reproducción es una función biológica inherente a todo ser vivo. Un individuo puede sobrevivir sin reproducirse pero una especie no. Es de tal importancia esta función que en muchas especies la inversión de energía en la reproducción conlleva a la muerte y dejar descendencia es el último de los actos vitales. Así sucede con especies de araña cuyos huevos son incubadosdentro de la madre y la descendencia se desarrolla devorando a su propia progenitora. Conocido también es el caso de la Mantis religiosa, una especie de insecto, donde es frecuente ver que la hembra se provee de reservas energéticas, para engendrar la descendencia, comiéndose al macho después de la cópula. Ejemplos como los anteriores nos hacen creer que el objetivo de todo el desarrollo de un...
PROTOCOLO DE SHAWN CARLSON
INTRODUCCIÓN
Con el desarrollo de esta práctica usted conocerá una técnica sencilla para extraer ADN, en la primera parte del laboratorio se desarrollará la metodología establecida, recuerde tomar datos cuantitativos exactos acerca del proceso, así como asegurarse de establecer el método adecuado para recopilar datos. En lasegunda parte usted podrá aplicar la técnica de extracción de ADN para establecer un experimento que le permita conocer datos con relación a una o más especies vegetales, es decir deberá aplicar el método aprendido en la comprobación de una hipótesis creada por usted con relación a cualquier especie vegetal.
MATERIALES.
DE USO COMÚN: Agua mineral, sal, bicarbonato, champú, fruta o verdura,isopropanol (frío), azul de metileno, vasos de precipitados grandes (250 ml), centrífuga, probeta (500 ml), matraces (500 ml), pipeta (5 ml).
PARA CADA GRUPO:
1 tubo de ensayo grande.
2 tubos de ensayo pequeños (para centrífuga).
1 vaso de precipitados pequeño.
1 varilla de vidrio.
1 pipeta PaSteur.
METODOLOGÍA
Preparación del tampón.
Elaborar lasiguiente mezcla: 240 ml agua mineral + 3 g de sal + 10 g de bicarbonato + 10 ml de champú. Enfríar a 0º C.
Preparación del material biológico.
La trituración del material biológico, mejor en frío. Se trocean las verduras, se les añade un poco de agua y a continuación se trituran.
Se toman 5 ml del triturado y se depositan en el tubo de ensayo grande. A continuación se le añaden 10 ml deltampón frío. Se agita VIGOROSAMENTE durante 2 minutos.
Centrifugación 5’.
El contenido del tubo de ensayo se separa en los dos tubos de ensayo pequeños, de manera que los dos tengan la misma masa. A continuación estos tubos se ponen en la centrífuga durante 5 min. Tras la centrifugación se recoge el sobrenadante (con cuidado de no coger el precipitado) de cada uno de los tubos de ensayo; para ellonos ayudamos de una pipeta Pasteur. Este sobrenadante se coloca en el vaso de precipitados pequeño.
Añadir 10 ml de isopropanol frío.
Se añade al vaso de precipitados sobre la muestra con mucho cuidado: para ello se va dejando caer el isopropanol sobre las paredes del vaso de precipitados.
Tras añadir el isopropanol en la muestra han quedado dos fases, una superior (contiene elisopropanol) y otra inferior. Se introduce la varilla de vidrio en la interfase entre el isopropanol y el resto de la muestra y se va moviendo la varilla con cuidado de uno a otro lado durante 1 min. Entonces se saca la varilla y en ella estará adherido el ADN.
Añadir una gota de azul de metileno al tubo de ensayo.
El método que hemos utilizado para extraer al ADN no es todo lo eficiente que sequisiera, con lo que en la muestra todavía queda ADN sin extraer. Al añadir el azul de metileno, en la interfase, se teñirán las fibras de ADN que no se han conseguido extraer.
REPRODUCCIÓN ASEXUAL
OBJETIVOS
Diferenciar las clases de reproducción asexual.
Observar las estructuras productoras de esporas en plantas y hongos.
Observar la gemación de las levaduras.
Aprender a realizar montajesde hongos.
INTRODUCCIÓN
La reproducción es una función biológica inherente a todo ser vivo. Un individuo puede sobrevivir sin reproducirse pero una especie no. Es de tal importancia esta función que en muchas especies la inversión de energía en la reproducción conlleva a la muerte y dejar descendencia es el último de los actos vitales. Así sucede con especies de araña cuyos huevos son incubadosdentro de la madre y la descendencia se desarrolla devorando a su propia progenitora. Conocido también es el caso de la Mantis religiosa, una especie de insecto, donde es frecuente ver que la hembra se provee de reservas energéticas, para engendrar la descendencia, comiéndose al macho después de la cópula. Ejemplos como los anteriores nos hacen creer que el objetivo de todo el desarrollo de un...
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