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MARCADORES MOLECULARES Y LA EXTRACCIÓN DE ADN
MOLECULAR MARKERS AND THE DNA EXTRACTION
REINALDO VELASCO MOSQUERA1

PALABRAS CLAVE:

RESUMEN

Marcadores moleculares, extracción de ADN, biología molecular,
diversidad genética.

En el presente artículo se hace una breve descripción de los marcadores
moleculares y de las categorías y técnicas basadas en hibridación y en la
reacción encadena de la polimerasa PCR. A continuación se hace una
esplicación detallada del método de extracción de ADN empleado en el laboratorio de Biología Molecular de la Universidad Nacional de Colombia, sede
Palmira, para los estudios de diversidad genética, enfatizando en las reacciones que ocurren a lo largo del proceso de extracción.

KEY WORDS:
Molecular markers, ADN extraction,
PCR, molecularbiology, genetic
diversity.

ABSTRACT
In the present article a brief description of molecular markers, the categories
and techniques based on hybridizing and the chain reaction of polymerase
PCR is done. Next it is explained thorough of the ADN extraction method for
the genetic diversity studies employed in the molecular biological laboratory
of the National University, headquartersPalmira, emphasizing in the reactions
that occurs throughout the extraction process.

INTRODUCCIÓN
Los marcadores moleculares o
marcadores ADN revelan sitios de
variación naturales a nivel de secuencia de ADN. A diferencia de los
____________
Recibido para evaluación: Diciembre 10 de 2004. Aprobado para publicación: Febrero 10 de 2005.
1

M. Sc. Especialista en Biotecnología, Grupo deInvestigación ASUBAGROIN FCA Unicauca.

Correspondencia: biotecnologia@unicauca.edu.co

marcadores controlados por genes
asociados a caracteres morfológicos (fenotipos de fácil identificación visual), las variaciones en los
marcadores de ADN no se muestran por sí mismas en el fenotipo,

Facultad de Ciencias Agropecuarias
Vol 3 No.1 Marzo 2005

porque pueden ser diferencias en un solonucleótido
del gen o en un pedazo de ADN repetitivo.
Los marcadores moleculares relacionados a una característica específica son de par ticular interés porque permiten identificar individuos que contengan
esa característica y diferenciarlos de los que no la
posean, es decir que dan información sobre la diversidad genética. Esto es un aspecto esencial en el
campo de la biología tanto aplicada comofundamental: Ecología, Biología de la Evolución, Taxonomía, Agronomía, Biotec-nología, Microbiología,
Genética, etc (1).
Un gran número de técnicas moleculares puede ser utilizado para obtener marcadores de diversidad mediante la
detección de polimor-fismo a nivel de ADN (2).
La mayoría de los marcadores moleculares se clasifican
en dos categorías de técnicas que se basan en la hibridación o enla Reacción en Cadena de la Polimerasa. PCR:
Marcadores detectados por hibridación.
Dentro de estos se agrupan las técnicas que emplean
sondas para la detección de los marcadores. Las sondas
son fragmentos de ADN o ARN que contienen el código
complementario para una secuencia específica del
genoma. Las técnicas más usuales son: Polimorfismo
en la longitud de los fragmentos de restricción(RFLP),
Número variable de repeticiones en tandem (VNTR) y ADNShips (Oligonucleotide arrays) (1).
Marcadores basados en la PCR.
Los marcadores identificados por amplificación del ADN
están basados en la reacción en cadena de la polimerasa.
La introducción de esta tecnología permitió nuevas posibilidades para la detección del polimorfismo genético
(3). El polimosrfismo se observa debido a quela variación en la secuencia del genoma altera los sitios de reconocimiento del “primer”. Permite la generación de
grandes números de marcadores, su utilización n o es
técnicamente difícil y solo utiliza mínimas cantidades de
material genético. Las técnicas basadas en la PCR difieren entre sí en la longitud y secuencia de los primers
empleados, condiciones de la PCR y en el método de...