alimentos




Laboratorio N°4
Estimación de Proteínas





Nombres : Constanza Cartes Iturrieta
Jose Diaz Cordova
Tania Ortiz Videla
Carolina Torres Godoy
Sección: 441
Asignatura : Química de los Alimentos






Introducción.
El contenido total de proteínas en los alimentos está conformado por una mezcla compleja de proteínas. Estas existen en una combinacióncon carbohidratos o lípidos, que puede ser física o química. Actualmente todos los métodos para determinar el contenido protéico total de los alimentos son de naturaleza empírica. Un método absoluto es el aislamiento y pesado directo de la proteína pero dicho método se utiliza  sólo a veces en investigaciones bioquímicas debido a que es dificultoso y poco práctico
En 1883 el investigador danésJohann Kjeldahl desarrolló el método más usado en la actualidad para el análisis de proteínas (método Kjeldahl) mediante la determinación del nitrógeno orgánico. En esta técnica se digieren las proteínas y otros componentes orgánicos de los alimentos en una mezcla con ácido sulfúrico en presencia de catalizadores.  El nitrógeno orgánico total se convierte mediante esta digestión en sulfato deamonio.  La mezcla digerida se neutraliza con una base y se destila posteriormente. El destilado se recoge en una solución de ácido bórico.  Los aniones del borato así formado se titulan con HCl (o H2SO4) estandarizado para determinar  el nitrógeno contenido en la muestra.
El resultado del análisis es una buena aproximación del contenido de proteína cruda del alimento ya que el nitrógeno tambiénproviene de componentes no proteicos.











Objetivos.

Aplica el método Kjeldahl para determinar el contenido de nitrógeno total y estimar el porcentaje de proteínas en diversos alimentos.
Calcula el contenido de proteínas en diversos alimentos, a partir de datos experimentales.




















MATERIALES Y REACTIVOS.

Alimentos de distinta naturaleza.Equipo de digestión y destilación para Kjeldahl.
Balanza analítica.
Balones de digestión Kjeldahl.
Matraces erlenmeyer de 250 mL.
Vasos de precipitado.
Buretas.
Probetas.
Pisetas.
Espátulas.
Perlas de vidrio.
Guantes.
Papel aluminio.
Acido sulfúrico concentrado.
Mezcla de catalizadores (tabletas).
Hidróxido de sodio al 40%.
Solución indicador de Tashiro.
Indicador rojo demetilo.
Solución de ácido bórico al 3%.
Agua destilada.
Acido sulfúrico de normalidad estándar 0,025N












Procedimiento.
Pesar al 0,1 mg alrededor de 100 mg de muestra seca en papel aluminio.

Depositar la muestra en un balón Kjeldahl. Tener cuidado al depositarla, ya que la muestra debe caer al fondo y no quedar en las paredes.

Agregar media tableta Kjeldahl, 5 ml deácido sulfúrico concentrado y unas perlitas de ebullición.

Colocar el balón Kjeldahl en la parrilla del digestor, poner a funcionar el extractor y encender la parrilla de calentamiento. Durante la digestión girar el matraz de vez en cuando.

Digerir, aproximadamente 30 minutos, hasta obtener una solución verde cristalina.

Una vez terminada la digestión apagar las parrillasde calentamiento y dejar enfriar hasta aproximadamente 40°C, sin dejar que el residuo solidifique.

Agregar lentamente y por las paredes del balón Kjeldahl 50 ml de agua destilada y 4 gotas de rojo de metilo. Agitar bien.

Preparar un matraz erlenmeyer con 25 ml de ácido bórico al 3% y 4 gotas de indicador tashiro.

Inclinar el balón Kjeldahl y agregar lentamente el álcali (aproximadamente30 a 40ml de NaOH al 40%) hasta viraje del indicador (rojo a amarillo verdoso).

Conectar inmediatamente el balón Kjeldahl al refrigerante del destilador, tapar herméticamente y agitar con movimientos circulares.

Verificar que las llaves del agua que enfrían el equipo estén abiertas y luego encender las parrillas de calentamiento.










Destilar aproximadamente 100ml de...