almidon

TRABAJAR CON PROTEINAS.
Para estudiar una proteína con cierto detalle es necesario separarla del resto de proteínas y disponer de técnicas que permitan determinar sus propiedades.

LAS PROTEINASSE PUEDEN SEPARAR Y PURIFICAR.
Los métodos de separación de proteínas aprovechan propiedades que varían de una proteína a otra:
Tamaño.
Carga.
Propiedades de unión.
Existe una amplia gama demétodos cromatograficos que explotan estas propiedades:
CROMATOGRAFIA DE INTERCAMBIO IONICO.
Aprovecha las diferencias en el signo y la magnitud de las cargas eléctricas netas de las proteínas a un pHdeterminado.




CROMATOGRAFIA DE EXCLUSION MOLECULAR.
Separa proteínas según su tamaño. Las proteínas de mayor tamaño emergen de las columnas antes que las pequeñas. La fase solida consiste enpequeñas perlas que contienen unos poros o cavidades de tamaño calibrado.
Las proteínas más grandes no pueden entrar por las cavidades por lo que toman el camino más corto a través de la columna.
Lasproteínas más pequeñas penetran en las cavidades, y por tanto migran más lentamente a través de la columna.


CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD.
Separa las proteínas según la especialidad de unión. Lasproteínas retenidas en la columna son las que se unen específicamente a un ligando unido covalentemente a las partículas.


LAS PROTEINAS PUEDEN SEPARARSE Y CARACTERIZARSE POR ELECTROFORESIS.ELECTROFORESIS: técnica importante para la separación de proteínas basada en el desplazamiento de estas cargadas en un campo electrónico.
La electroforesis en gel SDS y el enfoque isoeléctrico se puedenutilizar por separado o combinados para obtener una mejor resolución.
SDS: un método utilizado para la estimación de la pureza y la masa molecular.

Enfoque isoeléctrico: procedimiento utilizado paradeterminar el punto isoeléctrico de una proteína.




A fin de purificar una proteína es esencial disponer de un método para detectar y cuantificar dicha proteína en presencia de muchas...