Alumno
SUBSECRETARIA DE EDUCACION MEDIA SUPERIOR
INSTITUTO TECNOLOGICO DEL ALTIPLANO DE TLAXCALA
REPORTE DE PRACTICA 1
COLIFORMES Y CUENTA ESTÁNDAR.
TITULAR DE MATERIA:
CARLOS SÁNCHEZ GRANADOS
MATERIA:
MICROBIOLOGIA DE LOS ALIMENTOS
CUARTO SEMESTRE GRUPO “B”
ALUMNOS:
M. IMELDA FLORES CORTES
12 DE MARZO DEL 2007
INTRODUCCION
LOSCOLIFORMES SON BACILOS CORTOS QUE SE HAN DEFINIDO COMO BACTERIAS AEROBIAS Y ANAEROBIAS FACULTATIVAS QUE FERMENTAN LA LACTOSA CON PRODUCCIÓN DE GAS. LAS PREINCIPALES ESPECIES SON: ESCHERICHIA COLI Y ENTEROBACTER AEROGENES; EL GRUPO DE COLIFORMES FECALES UNCLUYE A LOS COLIFORMES CAPACES DE CRECER A TEMPERATURA ELEVADA (44.5 O 45ºC).
EL TERMINO COLIFORME SIRVE PARA DESIGNAR A GRUPOS DE BACTERIAS CAPACESDE CRECER EN CONDICIONES EXPERIMENTALES ESPECIFICAS.
ALGUNAS DE LAS PROPIEDADES QUE DETERMINAN QUE LAS BACTERIAS COLIFORMES SEAN IMPORTANTES EN LAS ALTERACIONES DE LOS ALIMENTOS SON: SU CAPACIDAD PARA CRECER EN SUSTRATOS MUY DISTINTOS Y PARA UTILIZAR COMO FUENTE DE ENERGIA ALGUNOS HIDRATOS DE CARBONO Y OTROS COMPUESTOS ORGANICOS, SU CAPACIDAD PARA SINTETIZAR LA MAYORIA DE VITAMINAS QUE NECESITAN,LA CAPACIDAD DE LAS BACTERIAS PARA CRECER EN UN INTERVALO DE TEMPERATURAS INFERIORES A 10º C Y MAXIMAS DE 46º.
OBJETIVO
• DETERMINAR LA EXISTENCIA DE COLIFORMES EN LAS PRINCIPALES FUENTES QUE TIENEN CONTACTO CON EL SER HUMANO (agua, tierra, aire).
MATERIALES
1. 6 CAJAS PETRI
2. 4 TUBOS DE ENSAYO
3. DOS MATRAZ ERLENMEYER DE 90 ML.
4. 3 PIPETA DE 2 ML.
5. 3PIPETAS DE 1 ML.
6. UNA PROBETA DE 50 ML.
7. UNA GRADILLA
8. UN MECHERO DE BUNSEN
9. UN PORTAPIPETEROS
10. PAPEL DE ESTRAZA
11. TORUNDAS CON ALCOHOL DEL 96
12. TORUNDAS CON ALCOHOL DEL 70
13. UN BAÑO MARIA
14. 10 CUBREOBJETOS
15. 10 PORTAOBJETOS
16. LUGOL
17. AZUL DE METILENO
18. MICROSCOPIO
19. AGUJA DE DISECCION
20. ASA DE PLATINO
21. AGAR CUENTAESTANDAR
22. AGAR BILIS. RV.
PROCEDIMIENTO
• ANTES QUE CUALQUIER PROCEDIMIENTO ES NECESARIO TENER ESTERILIZADOS TODOS LOS MATERIALES QUE SE VAN A OCUPAR, UN DIA ANTES DE LA SIEMBRA.
La ESTERILIZACION, consistente en la destrucción de todo microorganismo.
Estos han de ser esterilizados en el AUTOCLAVE mediante calor húmedo, de un depósito hermético que contiene agua y evacuado elaire. En este sistema el vapor de agua sobrecalentado a 121 (2atm) o 111º C (1.5atm). Esto se realiza un día antes de llevar a cabo la siembra para tener preparados ya los materiales estos son envueltos en papel de estraza para proteger los instrumentos.
• SE LIMPIA CON ALCOHOL DEL 96 LA MESA DE TRABAJO PARA EVITAR LOS MICROORGANISMOS DEL CUAL SE PUEDAN CONTAGIAR.
• SE SACAN DEL AUTOCLAVE LOSMATERIALES ESTERILIZADOS, SE DESTAPAN DEL PAPEL DE ESTRAZA.
• SE PREPARA EN EL MATRAZ CON 90 ML. DE AGUA EL MEDIO DE CULTIVO, SE LE AGREGAR AGAR CUENTA ESTANDAR SE PONE EN LA ESTUFA ELECTRICA SE CUBRE BIEN, SE DEJA HERVIR DURANTE UN MINUTO.
• SE PREPARA EN EL MATRAZ CON 90 ML. DE AGUA EL MEDIO DE CULTIVO, SE LE AGREGAR AGAR BILIS. R V. SE PONE EN LA ESTUFA ELECTRICA SE CUBRE BIEN, SE DEJA HERVIRDURANTE UN MINUTO.
• POSTERIORMENTE SE TRASLADA DE LA ESTUFA A UN BAÑO MARIA PREVIAMENTE A UNA TEMPERATURA DE 45° C, PARA QUE NO SE ENFRIE Y ESTE LISTO EN EL MOMENTO QUE SE UTILICE.
• SE ENCIENDE EL MECHERO
• EN UN MATRAZ DE ERLENMEYER SE AGREGAN 90 ML DE AGUA CON LA MUESTRA PREVIAMENTE PESADA DE TIERRA SE DISUELVE BIEN Y SE COLOCA EN LA MESA PARA LA SIEMBRA.
• ANTES DE SEMBRAR AGUA YTIERRA CON SUS MUESTRAS SE ABREN A LADO DEL MECHERO DOS CAJA S PETRI ESAS SON LAS DE AIRE.
• AHORA EN UN TUBO DE ENSAYO QUE CONTENGA LA MUESTRA DE AGUA TOMADA DEL VERTEDERO (ESTA ES UTILIZADA PARA SABER SI TIENE MICROORGANISMOS EL AGUA). SE LE SACAN 2 ML. DE AGUA CON UNA PIPETA DE 2 ML.
• UN ML SE LE AGREGA A UNA CAJA PETRI Y EL OTRO ML. SE LE AGREGA A OTRO TUBO DE ENSAYO QUE CONTENGA 9 ML....
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