ambiental


Materiales y métodos.
Suelo
5 pipetas de 1ml estéril.
Frasco de dilución de 90ml con agua destilada.
5 tubos de 16 x 150 mm con 9ml de agua destilada.
6 tubos de 16 x 150 mm c/tapón de roscacon agar nutritivo inclinados.
Agua destilada.
Pinzas.
Mechero.
Balanza
Asa bacteriológica.
Alcohol
Tween 80
SIEMBRA CRUZADA
Agar Emb.
Agar Rosa bengala
Agar nutritivo
Agar S.S
Agar PDAAgar Malta
Asa acodada
PROCEDIMIENTO
1. Pesar 10gr de suelo y colocarlo en condiciones de esterilidad en una botella de dilución conteniendo 90ml de agua destilada, agregar 1 gota de Tween 80(Descripción: Líquido oleoso, amarillo o amarillo pardusco, límpido o ligeramente opalescente. Soluble en agua etanol anhidro, acetato de etilo y metanol. Prácticamente insoluble en aceites grasos y enparafina liquida). Agitando y dejando reposar unos minutos.
2. Medir 1ml de suelo ya pesado se deposita en un tubo de agua estéril de cantidad de 9 ml para la respectiva dilución 1/10 .
3. A partirde lo anterior, tomar 1ml se procede a tomar un mililitro para la dilución 1/100 y de esta manera repetir la dilución hasta llegar a la dilución 1/100, 1/1000 y 1/10000.
4. Incubar los tubos a35-37°C durante 24h. para después realizar la siembra cruzada.






SIEMBRA CRUZADA
1. De cada una de las diluciones anteriores utilizar 1ml para realizar la siembre con asa acodadacorrespondiente sin importar la dilución al agar correspondiente.
2. Revisar los resultados, observando estructuras y posteriormente realizar la tinción de Gram.

AGARES
AGAR EMB

Agar selectivoutilizado para el aislamiento de bacilos Gram – en especial Enterobacteriaceae de rapido desarrollo y pocas exigencias nutricionales, tiene indicadores e inhibidores como los son el azul de metileno y eosinase puede videnciar la fermentacion de lactosa y sacarosa por el color que tomanlas colonias. E. coli tiene un caracteristico color verde metalico.
AGAR NUTRITIVO

Utilizado para el cultivo de...