ambiente aseptico

ANTECEDENTES

 El

estudio de microorganismos requiere la
utilización de una serie de técnicas que
permitan su aislamiento y su crecimiento
bajo condiciones controladas

 Considerando

que los microorganismos se
encuentran ampliamente distribuidos en
todos los ambientes de la biosfera, se debe
tener una serie de precauciones cuando
se realizan trabajos que involucrenmicroorganismos.

 El

material y los medios de cultivos deben
de ser utilizados en condiciones asépticas
para evitar su contaminación con los
microorganismos presentes en el medio
ambiente.

ASEPTICO
 El

término
aséptico
microorganismos.

 La

significa

"sin

técnica aséptica se refiere a las
prácticas que reducen la posibilidad de
que se introduzcan microorganismos
ajenosa nuestra área de trabajo.

TECNICAS ASEPTICAS
 Trabajar

siempre al lado de una llama.
Esta llama crea a su alrededor una
atmósfera estéril y además la utilizaremos
para esterilizar o flamear parte del
material que utilizamos durante la
siembra.

Las asas deben esterilizarse
antes de utilizarlas y una vez
esterilizadas deben enfriarse
antes de tomar la muestra
demicroorganismos con
objeto de no destruirlos con
el calor.
El asa se enfría sobre el agar
o sobre el material (en zonas
estériles).Después
de
utilizarlas las asas se vuelven
a esterilizar.

Las bocas de los tubos y matraces de vidrio se
flamean ligeramente una vez destapados y
después de la inoculación.

Durante la inoculación, los tapones se
mantienen en la mano sujetándolos por la parte
queno entra en contacto con tubos y matraces.

Las tapas de las placas de Petri no deben
colocarse nunca sobre la mesa de trabajo.

Si
mantenemos
estas
precauciones
evitaremos incorporar microorganismos de
otra fuente extraña (CONTAMINANTES) a la
que estamos analizando.

AISLAMIENTO DE
MICROORGANISMOS
 En

la naturaleza, los microorganismos se
encuentran
formando
poblacionesmixtas
con
otros
tipos
de
microorganismos.

 Sin

embargo, el conocimiento de los
microorganismos se consigue mediante el
estudio de cepas aisladas, cultivadas en
el laboratorio en cultivos puros (o
axénicos).

AISLAMIENTO


Es la separación de un determinado
microorganismo del resto de microorganismos
que lo acompañan.



Para
aislar
células
individuales,
losmicroorganismos deben de ser diluidos, debido
al gran numero de microorganismos presentes.



Para lo cual se utilizan dos métodos: estría
cruzada y siembra por dispersión en superficie.

ESTRIA CRUZADA
un
método
cualitativo.

SIEMBRA POR
DISPERSION EN
SUPERFICIE

 Es

 Es

 Permite

 Permite

trabajar un
gran numero de
muestras en corto
tiempo.

un
métodocuantitativo.
aislar y
cuantificar a los
microorganismos.

ESTRIA CRUZADA
Esterilizar el asa de
siembra por flameado
en la llama de un
mechero.

Introducirla
en
la
suspensión bacteriana
para
recoger
una
muestra

Sembrar
haciendo estrías
sobre
la
superficie de un
medio sólido en
una caja Petri.

Volver a esterilizar el asa, dejar enfriar el asa sobre el agar,
tocar en unextremo de la zona ya sembrada y hacer un
segundo grupo de estrías en una región nueva de la placa.
Repetir el proceso una tercera y una cuarta vez, hasta
conseguir que los grupos de células se diluyan y se separen
células aisladas.

DILUCIONES SERIADAS
 Hacer

diluciones
seriadas
de
la
suspensión bacteriana hasta obtener una
muestra con sólo unos pocos cientos de
bacterias.

Adicionar

la muestra en un tubo y verter el
contenido en una caja Petri.

 Después

de la incubación, se observara el
desarrollo de colonias en el agar.

METODOLOGIA

A) Preparación de la muestra

Se coloco una muestra de suelo en
agua destilada estéril y se dejo
reposar por unos minutos

Método de siembra por Dispersión
en Superficie

Método de estría cruzada...