Ambiente

Prueba de citrato:
Es una prueba sirve para determinar si un organismo es capaz de utilizar citrato como única fuente de carbono y compuestos amoniacales como únicafuente de nitrógeno en su metabolismo, provocando una alcalinización del medio. Entre las enterobacterias estas características se dan en los siguientesgéneros: Enterobacter, Klebsiella, Serratia,Citrobacter y algunas especies de Salmonella. Sin embargo, Escherichia, Shigella,Salmonella typhi y Salmonella paratyphi son incapaces de crecer con esosnutrientes.
Se cultiva el microorganismo en agar citrato de Simmons. Este medio contiene citrato de sodio y fosfato de amonio como fuentes de carbono y de nitrógenorespectivamente y azul de bromotimol como indicador de pH. Sólo las bacterias capaces de metabolizar el citrato podrán multiplicarse en este medio y liberarán iones amonio lo que,junto con la eliminación del citrato (ácido), generará una fuerte basificación del medio que será aparente por un cambio de color del indicador de pH, de verde a azul.Procedimiento de la prueba:
El medio se inocula (con un inóculo ligero) haciendo una estría en el bisel, con un filamento cargado con poca cantidad de inóculo, obtenido deun cultivo en medio sólido. Se incuba a 35°C por 24-48 horas. 
Resultados:
El desarrollo de crecimiento en este medio y el viraje del indicador de verde a azul, indicanque el microorganismo es capaz de utilizar el citrato como única fuente de carbono.
Esta prueba permite diferenciar a las enterobacterias basándose en la utili-zación delcitrato. Entre las enterobacterias citrato negativas están Esche-richia y Shigella y entre las citrato positivas Arizona,Citrobacter, Klebsiella, Salmonella y Serratia.