amilasas

Amilasa salival sobre almidón y glucógeno
La función del almidón es almacenar alimento para las plantas es una fuente de carbono y energía. Los vegetales tienen dos enzimas hidroliticas que son α-amilasa y β-amilasa, ambas atacan la fracción de amilosa y amilopectina en los enlaces α(1-4). El rompimiento con α-amilasa es aleatorio de modo que ocurre en diferentes puntos y da por resultado unamezcla de glucosa y maltosa.
El almidón puede ser digerido por los seres humanos y por la mayoría de organismos debido a la amilasa salival y la amilasa pancreática en acción combinada con otras enzimas como la maltasa degradan por completo el almidón a α-D-glucosa la cual es absorbida y metabolizada posteriormente. En las células animales y bacterias el glucógeno es el que cumple la función dealmacenamiento. En los animales superiores los gránulos de glucógeno abundan sobre todo en las células del hígado y en el tejido muscular. El glucógeno es una molécula de poliglucosa ramificada idéntica a la fracción de amilopectina del almidón solo que el glucógeno esta mas ramificado, dentro de la célula el glucógeno se degrada por la fosfarilasa del glucógeno, enzima que retira de manerasecuencial un residuo de glucosa a la vez desde cualquier de los extremos no reductores formando glucosa-1-fosfato .
La prueba de yodo: la amilosa y la amilopectina se comportan de manera diferente en el yodo la fracción amilosa del almidón se combina con muchas yodo y produce un complejo azul intenso profundo el complejo amilosa yodo es un complejo de absorción de almidón y yodo, más que un compuestodefinido, las moléculas de yodo están atrapadas dentro de las hélices no ramificas de glucosa glucosa, de la cadena de amilosa para formar un compuesto de inclusión azul Este tipo de prueba puede realizarse con cualquier producto que contenga almidón como ser patatas, pan o determinados frutos.
Esta reacción es el resultado de la formación de cadenas de poliyoduro a partir de la reacción delalmidón con el yodo presente en la solución de un reactivo llamado Lugol. La amilosa, el componente del almidón de cadena lineal, forma hélices donde se juntan las moléculas de yodo, formando un color azul oscuro a negro. La amilopectina, el componente del almidón de cadena ramificada, forma hélices mucho más cortas, y las moléculas de yodo son incapaces de juntarse, obteniéndose un color entre naranja yamarillo. Al romperse o hidrolizarse el almidón en unidades más pequeñas de carbohidrato, el color azul-negro desaparece. En consecuencia, esta prueba puede determinar el final de una hidrólisis, cuando ya no hay cambio de color constituyendo una evidencia experimental ampliamente utilizada.
La solución de yodo también reacciona con el glucógeno, aunque el color producido es más castaño y muchomenos intenso.




Objetivo:
Identificar la degradación del almidón y el glucógeno por la acción de la enzima amilasa salival a diferentes temperaturas con la tinción de lugol.
Hipótesis:
La amilasa salival actuara sobre el almidón y glucógeno a temperatura corporal de 37°c, en temperaturas más extremas no lo hará.
Método:
Obtener saliva humana con una jeringa y filtrarla con algodón.Para obtener almidón Poner 50gr de arroz en 100 ml de agua y calentar a 96°c.para obtener el glucógeno triturar el hígado de pollo en un mortero agregar 150ml de agua y calentar a 96°c después acidificar con HCL a pH 1-2,filtrar en etanol a 0°c. En cuatro tubos de ensayo colocar .5ml de saliva después agregar 0.5 ml de almidón a cada tubo más 2 gotas de lugol y llevar las muestras a lasdiferentes condiciones de: 0°c, 20°c, 37°c y 56°c. Hacer lo mismo con las muestras de glucógeno. Posteriormente realizar cortes finos de tejido de papa y plátano, agregar dos gotas de lugol a cada muestra. Observar y comparar.
Resultados:

Almidón 0.5ml +0.5 saliva + 2 gotas de lugol a las distintas temperaturas
De derecha a izquierda tubo muestra control 20°c, 37°c, 56°c, y 0°c
Glucógeno...