aminas

INTRODUCCION
Las peroxidasas son un tipo de enzimas muy extendidas en toda la escala filogenética. Pertenecen a la categoría de las oxidorreductasas y según el Comité de Nomenclatura de la Unión Internacional de Bioquímica y Biología Molecular se clasifican con los números EC 1.11. La peroxidasa, EC 1.11.1.7, es una enzima que cataliza la oxidación de un amplio número de sustratos orgánicos einorgánicos, utilizando el poder oxidante del peróxido de hidrógeno.
Donante + H2O2 Donante oxidado + H2O
Esta enzima utiliza como cofactor el grupo hemo.
Es utilizada ampliamente en bioquímica clínica. Así, los ensayos para la determinación y cuantificación de metabolitos como glucosa, ácido úrico, colesterol o triglicéridos en fluidos biológicos usan peroxidasa como enzima acoplada. También seutiliza en inmunoensayos para la detección de virus tan conocidos como el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) causante del sida o el herpesvirus. La peroxidasa también se utiliza como biocatalizador para la generación de productos de interés biotecnológico e industrial como resinas fenólicas, adhesivos, antioxidantes, antiestáticos y protectores de radiación magnética, colorantesalimentarios y componentes bioactivos de detergentes.
Los genes de las peroxidasas humanas expresan una cadena ligera y una cadena larga. La enzimas activas son un h El ser humano también sintetiza la mieloperoxidasa. Esta enzima se utiliza en el sistema inmunitario con funciones bactericidas.
Las polifenol oxidasas (denominado abreviadamente como PPOs) son enzimas (encontradas principalmente en plantasy hongos) que catalizan una reacción que transforma o-difenoles en o-quinonas. Las o-quinonas son muy reactivas y atacan a una gran variedad de componentes celulares, favoreciendo la formación de polímeros negro-marrón. Estos polímeros son los responsables del oscurecimiento de tejidos vegetales cuando se dañan físicamente. Esto se observa fácilmente en plátanos o patatas, que tienen altos nivelesde PPOs.
Cuando la célula se encuentra sana e intacta, las PPOs y sus sustratos, los fenoles, se encuentran en compartimientos separados (cloroplastos y vacuolas, respectivamente). Sin embargo, cuando la célula se desorganiza al envejecer, o como resultado de daño físico o infeccioso, las enzimas y sustratos se juntan y sucede la reacción descrita. El oscurecimiento producido por estas enzimascausa grandes pérdidas a la industria agropecuaria. Por esto, el contenido de polifenol oxidasas, y su nivel de actividad son muy importantes para determinar la calidad de frutos y vegetales.

OBJETIVO
Observar y comprobar la actividad e inhibición de Px y PFO utilizando un extracto de papa para ambas enzimas.

MATERIAL Y REACTIVOS.
Gradilla
15 tubos de ensaye de 13X100
2 vasos deprecipitado de 250 ml
Pinzas para tubo de ensaye
Pipeta de 5 ml
Mortero
Cuba
Agitador
3 pipeta de 1 ml
Mechero, tripie y tela.
Cada grupo se responsabilizara de traer una papa para realizar el experimento y una tela para filtrar, como también hielo.
PROCEDIMIENTO:
1. Prepara una cuba con hielo y agua para meter el vaso de precipitado con unos 100 ml de agua destila, dejarenfriar 5 min.
2. Cortar en rebanadas la papa y echarla al vaso con agua destila fría, dejar reposar alrededor de 10 min, agitando seguido.
3. Pasar todo por el filtro de la tela a otro vaso de precipitado previamente puesto en agua fría.
4. Dejar reposar unos 5 min para que el almidón se asiente. Debe quedar por lo menos 50 ml de lo que llamaremos extracto de papa.
5. Preparar una gradillacon 13 tubos de enumerados.
6. Pipetee .5 ml de Catecol al 1% a los tubos 1, 2, 3, 4 y 11.
7. Pipetee .5 ml de Pirogalol al 1% a los tubos 5, 6, 7, 8 y 12
8. Pipetee 2.0 ml de Tirosina al 1% a los tubos 9 y 10
9. Pipetee. 5 ml de H2O2 al 3% a los tubos 2, 4, 6, 8, 10, 11 y 12
10. Agregar 4 gotas de Cianuro de sodio al 5% a los tubos 7 y 8
11. Pipetee 5 ml de extracto de papa a dos tubos de...