aminoacidos

UNIVERSIDAD NACIONAL EXPERIMENTAL
“ROMULO GALLEGOS”
AREA DE INGENIERIA AGRONOMICA
DIRECCION DE ESTUDIOS COMUNES
DEPARTAMENTO DE ASIGNATURAS INSTRUMENTALES
CATEDRA DE BIOQUIMICA

PRACTICA Nº 1:
Identificación de Aminoácidos y Proteínas
Introducción:
Las proteínas son sustancias químicas orgánicas de alto peso molecular, constituida por muchos
aminoácidos, que juegan un papel muyimportante en la estructura y dinámica de la materia viva.
Solamente 20 aminoácidos diferentes se encuentran formando parte de las proteínas; sin
embargo, no todas las proteínas contienen los 20 aminoácidos.
En esta práctica vamos a realizar reacciones cualitativas de coloración, que nos permitirán
detectar, la presencia de grupos químicos en aminoácidos y proteínas.
Fundamento de las Reacciones:1) Reacción de la ninhidrina:
Esta es una reacción general para cualquier aminoácido y es debido a la presencia del grupo amino
(NH2), de manera de que todos los alfa aminoácidos y por supuesto las proteínas dan positiva a esta
reacción. No obstante, cualquier sustancia proteica que contenga un grupo alfa-NH 2 también de
positiva a esta reacción, la reacción se efectúa en tres etapas.
1.1 .-Reducción de la ninhidrina oxidada por la acción del alfa aminoácido

1.2 .- Hidrólisis del Aminoácido producido para formar un alfa cetoácido, el cual se carboxila bajo
las condiciones de la reacción.

1.3 .- Finalmente, el Amoniaco (NH3) reducido reacciona con cantidades equimolares de ninhidrina
oxidada y ninhidrina reducida para formar un compuesto de color azul violeta, la intensidaddel
color es proporcionada a la cantidad de aminoácidos presentes.

La ecuación Global es

Azul Violeta

Esta reacción se desarrolla mejor a pH neutro. Todos los aminoácidos dan color azul violeta,
con excepción de prolina e hidroxiprolina que da color amarillo.
2) Reacción de Biuret:
Esta reacción es característica para aquellos compuestos que poseen dos o mas enlaces peptídicos.
Ladenominación “Biuret” se debe a que el compuesto orgánico Biuret también da positiva a esta
reacción. La reacción de Biuret se basa en las formaciones en medio alcalino, de un complejo de
coordinación de color violeta entre el ión cúprico (Cu +2) y 4 átomos de nitrógeno, provenientes de las
cadenas peptídicas.

3) Reacción Xantoproteica:
Con esta reacción podemos identificar la presencia de losaminoácidos aromáticos
triptofano).

(tirosina,

La reacción se basa en la nitración del anillo bencénico con acido nítrico, produciendo derivados
del nitrobenceno de color amarillo. Estos derivados amarillos se tornan anaranjados a la alcalinidad de
la solución con NH4OH o NaOH. En las condiciones de la reacción la fenilalanina es difícil de nitrar
por cuanto se requiere la presencia deun catalizador.
3) Reacción de Millón:
Esta reacción es específica para el grupo hidroxifenil. Por lo que el aminoácido tirosina da positiva
a esta reacción. Se cree que el grupo hidroxifenil primero forma un derivado nitrato con el Acido
Nitrico (HNO3), que luego reacciona con el mercurio y forma un complejo de color rojo.
4) Reacción Sakaguchi:
Esta es una reacción específica para el grupoGuanidrina. Por lo tanto el aminoácido arginina da
positiva a esta reacción.

La Guanadina en Solución alcalina, da un color rojo en presencia de alfa-naftol e Hipodromito de
Sodio.
PREGUNTAS DE PRE LABORATORIO:
1.- Defina las siguientes palabras:
Aminoácido
Proteína
Peptido
2.- Dibuje la estructura general de los aminoácidos, identificando cada uno de los grupos funcionales
queposeen.
3.- Dibuje a Estructura de los siguientes aminoácidos: Tirosina, Leucina, Metionina, Lisina, Triptofano
y arginina
4.- Haga la clasificación de los aminoácidos según su grupo R

PARTE EXPERIMENTAL
OBJETIVOS:
a) Reconocer los Grupos ∞-aminos de los aminoácidos.
b) Diferenciar aminoácidos libres de compuestos con dos o mas enlaces peptídicos.

c) Identificar aminoácidos aromáticos....