Ana lisis de Tilley y Terry
Páginas: 7 (1717 palabras)
Publicado: 13 de septiembre de 2015
Análisis de Tilley y Terry
El método Tilley y Terry propuesto en 1963, fue el precursor del método de fermentación in vitro en dos etapas. También conocido como "two-stage", se basa en la acción de dos tratamientos consecutivos, uno biológico y el otro químico sobre la muestra a analizar. Este análisis está diseñado para obtener la digestibilidad verdadera por determinación de losconstituyentes no digeridos de las paredes celulares.
El tratamiento biológico se refiere a una digestión anaeróbica de una muestra seca de forraje con microorganismos ruminales, a 38º C por 48 horas y bajo oscuridad. La digestión debe hacerse en tubos de vidrio asegurándose de que la producción de gas, como consecuencia de la fermentación, mantiene la condición de anaerobiosis. Además del licor ruminal, sedebe agregar un cierto volumen de solución amortiguadora capaz de mantener un pH adecuado para la digestión.
El segundo paso de este método, el tratamiento químico, consta de una digestión en pepsina, cuya finalidad es solubilizar la gran proporción de proteína que resiste al tratamiento biológico previo. Es importante en este método que la digestión sea anaeróbia, a una temperatura de 39 - 40º C ya un pH constante de 6.8 - 6.9. Esto último se consigue utilizando soluciones tampones o "salivas artificiales" de manera que el grado de acidez final no exceda del normal en el rumen.
Tilley y Terry fijaron el tiempo de incubación en 48 horas, aun cuando exista evidencia experimental de que la digestión de la celulosa puede prolongarse más que ese tiempo, aumentando el valor de digestibilidadobtenido y disminuyendo los coeficientes de variación. Considerando que al cabo de las 48 horas el proceso de digestión de los carbohidratos estructurales es prácticamente completa, lo que no ocurre en este período sería la solubilización de la proteína potencialmente digestible del forraje. Esto explica en parte el fenómeno del aumento aparente de la digestibilidad, cuando la incubación seprolongaba más allá del tiempo indicado. En base de esto, se propuso la incorporación de una segunda etapa del método consistente en una digestión proteica con pepsina. Esta etapa no requiere de condiciones anaeróbicas; pero se necesitan otras 48 horas más a 39 – 40º C.
El método in vitro tiene la dificultad que presupone el tener que mantener animales fistulados en el rumen, que deben ser de la mismaespecie, ya que se ha observado que con la utilización de jugo ruminal de especies diferentes, se obtienen resultados distintos. Opciones para sobrellevar este problema son el uso de heces como proveedores de enzimas microbianas (Omed et al., 2000), y preparados de enzimas puras (Jones y Theodorou, 2000). Sin embargo estas técnicas alternativas no están exentas de problemas, ya sea porvariabilidad en la composición de las heces o en el tipo y actividad de las enzimas.
Contreras, J.L., Juárez, F.I., Montero-Lagunes, M. Determinación de la tasa de digestión en forrajes. Cornell University.
Colombatto, D. Análisis de alimentos: Aplicaciones prácticas. Departamento de Producción Animal, Buenos Aires.
Tobal, C.F. Evaluación de los alimentos a través de diferentes métodos de digestibilidad.Universidad Nacional de la Pampa, Argentina.
Cromatografía en capa fina
La cromatografía es un método físico que permite la separación de mezclas de sustancias en sus componentes individuales.
La idea y los fundamentos de la utilización de un adsorbente cromatográfico dispuesto como una delgada capa sobre un soporte inerte rígido, son atribuidos a los investigadores Izmailov y a Shaiber(1938). Ellos analizaron tinturas farmacéuticas por cromatografía en capa fina utilizando albúmina como adsorbente en una placa de vidrio, con el objetivo de obtener cromatogramas circulares.
En la cromatografía en capa fina, se realiza la separación de los componentes de una mezcla a través de la migración diferencial sobre una capa fina de adsorbente, retenida sobre una superficie plana. En esta...
El método Tilley y Terry propuesto en 1963, fue el precursor del método de fermentación in vitro en dos etapas. También conocido como "two-stage", se basa en la acción de dos tratamientos consecutivos, uno biológico y el otro químico sobre la muestra a analizar. Este análisis está diseñado para obtener la digestibilidad verdadera por determinación de losconstituyentes no digeridos de las paredes celulares.
El tratamiento biológico se refiere a una digestión anaeróbica de una muestra seca de forraje con microorganismos ruminales, a 38º C por 48 horas y bajo oscuridad. La digestión debe hacerse en tubos de vidrio asegurándose de que la producción de gas, como consecuencia de la fermentación, mantiene la condición de anaerobiosis. Además del licor ruminal, sedebe agregar un cierto volumen de solución amortiguadora capaz de mantener un pH adecuado para la digestión.
El segundo paso de este método, el tratamiento químico, consta de una digestión en pepsina, cuya finalidad es solubilizar la gran proporción de proteína que resiste al tratamiento biológico previo. Es importante en este método que la digestión sea anaeróbia, a una temperatura de 39 - 40º C ya un pH constante de 6.8 - 6.9. Esto último se consigue utilizando soluciones tampones o "salivas artificiales" de manera que el grado de acidez final no exceda del normal en el rumen.
Tilley y Terry fijaron el tiempo de incubación en 48 horas, aun cuando exista evidencia experimental de que la digestión de la celulosa puede prolongarse más que ese tiempo, aumentando el valor de digestibilidadobtenido y disminuyendo los coeficientes de variación. Considerando que al cabo de las 48 horas el proceso de digestión de los carbohidratos estructurales es prácticamente completa, lo que no ocurre en este período sería la solubilización de la proteína potencialmente digestible del forraje. Esto explica en parte el fenómeno del aumento aparente de la digestibilidad, cuando la incubación seprolongaba más allá del tiempo indicado. En base de esto, se propuso la incorporación de una segunda etapa del método consistente en una digestión proteica con pepsina. Esta etapa no requiere de condiciones anaeróbicas; pero se necesitan otras 48 horas más a 39 – 40º C.
El método in vitro tiene la dificultad que presupone el tener que mantener animales fistulados en el rumen, que deben ser de la mismaespecie, ya que se ha observado que con la utilización de jugo ruminal de especies diferentes, se obtienen resultados distintos. Opciones para sobrellevar este problema son el uso de heces como proveedores de enzimas microbianas (Omed et al., 2000), y preparados de enzimas puras (Jones y Theodorou, 2000). Sin embargo estas técnicas alternativas no están exentas de problemas, ya sea porvariabilidad en la composición de las heces o en el tipo y actividad de las enzimas.
Contreras, J.L., Juárez, F.I., Montero-Lagunes, M. Determinación de la tasa de digestión en forrajes. Cornell University.
Colombatto, D. Análisis de alimentos: Aplicaciones prácticas. Departamento de Producción Animal, Buenos Aires.
Tobal, C.F. Evaluación de los alimentos a través de diferentes métodos de digestibilidad.Universidad Nacional de la Pampa, Argentina.
Cromatografía en capa fina
La cromatografía es un método físico que permite la separación de mezclas de sustancias en sus componentes individuales.
La idea y los fundamentos de la utilización de un adsorbente cromatográfico dispuesto como una delgada capa sobre un soporte inerte rígido, son atribuidos a los investigadores Izmailov y a Shaiber(1938). Ellos analizaron tinturas farmacéuticas por cromatografía en capa fina utilizando albúmina como adsorbente en una placa de vidrio, con el objetivo de obtener cromatogramas circulares.
En la cromatografía en capa fina, se realiza la separación de los componentes de una mezcla a través de la migración diferencial sobre una capa fina de adsorbente, retenida sobre una superficie plana. En esta...
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