Analisis bacteriano

Universidad Arturo Prat
Facultad de Recursos Naturales Renovables













“Análisis Bacteriano”












Introducción

Las bacterias son organismos unicelulares procariontes. Esto quiere decir que carecen de un núcleo en el cual se encuentra el material genético (DNA) como es el caso de las células eucariontes. En el caso de las bacterias el materialgenético se encuentra libre en el citoplasma. A pesar de su sencilla organización celular, cuentan con una pared celular (capa de polisacáridos) que envuelven la célula, proporcionándole rigidez y protección.
Estos organismos son tan pequeños que es imposible observarlas a simple vista, pero cuando estos logran agruparse formando grandes colonias es cuando las podemos reconocer.

Existen distintostipos de bacterias según su forma, respiración y cremento. El procedimiento que se llevó a cabo guarda relación con estos microorganismos, los cuales fueron extraídos de boca, nariz, oreja, entre otros. Para luego observar su inmersión, su morfología, agrupación y afinidad tintorial.

La actividad fue dividida en dos secciones:
El primer paso fue el aislamiento de bacterias. Se extrajo diferentesmuestras del organismo de tres individuos distintos con una torula estéril. A partir de las muestras obtenidas se procedió a sembrar las bacterias en una capsula de Petri con agar.
El segundo paso es la observación, donde se realizó un proceso llamado frotis para que de esta forma fuera más fácil observar las bacterias a través del microscopio

A continuación se expondrán la metodología llevadaa cabo para el análisis de las muestras obtenidas a través del frotis y tinción gram.












Metodología

Necesitamos observar bacterias de tipo epiteliales de diferentes partes del cuerpo como cuello, oreja, ombligo, pared bucal, ente otras, para lo cual haremos un procedimiento llamado frotis que es básicamente tomar una muestra de bacterias con una aguja de disecciónpreviamente estilizada y frotarla sobre un porta objetos el cual nos permitirá visualizar el tipo de bacterias observadas. En regiones epiteliales podemos en general encontrar dos tipos de bacterias; estreptococos y estafilococos.
A continuación el método de trabajo empleado.

Objetivo:
a) Visualizar bacterias en tinción Gram y conocer su orden posicional para determinar el tipo de bacteriaobservada
b) Comprender la morfología y complejidad bacteriana

Materiales
Porta objeto
1 gota de H2O destilada
Plumón punta fina
Secado ( mechero)
Sellante ( cinta parafilm)
2 pares de Capsulas Petri
Agar en una pared de la capsula Petri
Cotonete
Microscopio
Glicerina
Para la tinción; cristal violeta, lugol, alcohol y safranina.
Papel para secar
Pinzas de madera
Aguja de disecciónHorno Pasteur






Procedimiento:

1. El agar es una gelatina vegetal de tipo marino que es utilizado para aplicar una presión selectiva a los organismos que crecen en ella. El agar debe ya encontrarse en la capsula para generar el cultivo, luego se dispone en las capsulas Petri marcar 4 espacios en cada una para tener 8 muestras, las que fueron sacadas anteriormente del cuerpo conun cotonete y se procede a ubicarlas en los espacios determinados en ella. Marcamos las muestras con un plumón punta fina, las sellamos con la cinta parafilm y dejamos las capsulas en un horno Pasteur para retirarlas 72 horas más tarde.

2. Luego de que las bacterias hayan estado a una temperatura adecuada en el horno procedemos a hacer el frotis.


3. Con la aguja de disección previamenteestelarizada en el mechero tomamos una pequeña muestra de nuestros cultivos seleccionados y los disponemos en los porta objetos agregándole una gota de agua destilada.

4. Con una pinza de madera tomamos nuestra muestra ubicada en el porta objetos y la pasamos ligeramente por el fuego hasta que esta se seque.


5. Tinción: procedemos a la tinción Gram de cada muestra
A) cristal...