Analisis De Acidos Y Bases

RECUENTO DEL NÚMERO DE BACTERIAS
T. de la Rubia y J. Martínez


OBJETIVOS
El alumno aprenderá a:
1. Utilizar correctamente pipetas y micropipetas preparando diluciones decimales seriadas de una suspensión de bacterias


2. Determinar la concentración bacterias viables (entendidas como unidades vormadoras de colonias) en una muestra


|Contenido:|
|I INTRODUCCIÓN |
|II MÉTODOS |
|III RESULTADOS|
|IV AUTOEVALUACIÓN |





































|INTRODUCCIÓN|
|En diversos estudios microbiológicos (como análisis de alimentos, de agua de bebida, de productos farmacéuticos o del |
|medioambiente entre otros), se requiere conocer el número de microorganismos presentes en un material con objeto de determinar |
|su calidad. El procedimiento es esencialmente el mismo que para la medida del crecimiento de laspoblaciones de bacterias |
|El crecimiento de poblaciones microbianas puede determinarse mediante métodos de medida de la masa total celular, que |
|generalmente es directamente proporcional al número de células, (métodos de determinación del peso, de la actividad del cultivo |
|o métodos turbidimétricos) o por la determinación del número de células.|
|Encontrará información más completa sobre medidas del crecimiento de bacterias en los apuntes on line del Profesor D. E. Iañez |
|Principales métodos de recuento del |El número de bacterias de una muestra puede determinarse directamente por recuento del |
|número bacterias en una muestra |número total de células o indirectamente por la estimación del número másprobable, por |
| |filtración o por el recuento de viables en placa (Células capaces de dividirse sobre o |
| |dentro de un medio sólido, también se refieren como unidades formadoras de colonias UFC). |
|1.1.Recuento directo de bacterias al|Es una técnica para determinar o recontar el número total de organismos de unamuestra: Se |
|microscopio |utilizan cámaras de recuento (Cámara de Petroff-Hauser) y visualización al microscopio. Es |
| |un método rápido del número total de células de una muestra pero no distingue entre viables|
| |o no viables.|
|1.2.Recuento directo con contadores |Se utiliza el contador Coulter recuenta el número de células suspendidas en un líquido, a |
|electrónicos |su paso por un orificio por donde fluye la corriente eléctrica. Se puede determinar a su |
| |vez el tamaño de las células pero tampoco distingue entre viables, muertas o partículas.|
|1.3. Recuento en filtros de membrana|En este método el recuento se realiza por filtración de un volumen de la muestra a través |
| |de un filtro de membrana de tamaño adecuado para retener a las bacterias (0.22-0.45 µm). |
| |Una vez filtrada la muestra, el filtro se coloca sobre un medio de cultivo sólido y se...