analisis de genes o genomas

Tema 1O “Análisis de genes y genomas”.

1970. Año en que se aisló por primera vez un determinado fragmento de ADN, lo que impulsó el desarrollo de la ingeniería genética.
Nucleasas derestricción. Clase de enzimas bacterianas que catalizan las hidrólisis del enlace fosfodiéster del ácido nucleico, cortando al ADN bicatenario en sitios específicos determinados por la secuencia de pares denucleótidos.
Nucleasas de restricción “romo”. Son las nucleasas de restricción que cortan al ADN bicatenario de forma RECTA, dejando extremos romos. Ejemplo: “Haelll” y “Alul”.
Nucleasas de restricción“escalonado”. Son las nucleasas de restricción que cortan al ADN de tal forma que dejan un tipo “escalera”, que son extremos cohesivos. Ejemplo: “EcoRi”, “HindIII” y “NotI”.
Electroforesis en gel. Es unmétodo físico de laboratorio utilizado para la separación de fragmentos de ADN según su LONGITUD y PESO MOLECULAR. Pasos:
Se colocan los fragmentos de ADN en uno de los extremos del gel depoliacrilamida o agarosa, ambos geles, contienen microporos que permitirán el paso de las moléculas de ADN.
Se aplica un voltaje con electrodos en una solución acuosa, donde el ADN avanzará hacia el poloPOSITIVO debido a que contiene una carga NEGATIVA.
Luego de unas horas, los fragmentos formarán en el gel unas BANDAS ESPECÍFICAS de los pesos moleculares de los fragmentos. El avance y la velocidad delADN por el gel depende de su longitud y su tamaño: mientras más grande, más lento y menos avanza.
Se aíslan las bandas específicas de los fragmentos de ADN al cortarse del gel de agarosa opoliacrilamida usando un bisturí u hoja de afeitar.
Para visualizar las bandas en el gel, se tiñe usando isótopos radiactivos que le den fluorescencia al fragmento de ADN; el más usado es el 32P, que se unen alos fosfatos fácilmente y se detectan por autorradiografía.
Hibridación o Renaturalización. Es el proceso por el cual, la molécula de ADN monocatenaria vuelve a crear sus PUENTES DE HIDRÓGENO...