analisis enzimatico en trucha arcoiris



INTRODUCCION
Oncorhynchus mykiss o trucha arcoíris es un pez de agua dulce de la familia de los Salmónidos, los individuos utilizados provinieron de la piscicultura Pangue, ubicada en el Km. 4 camino a Florida, VIII Región, a partir de ello se realizo una extracción de órganos de gran importancia metabólica para realizar un análisis de la actividad enzimática en condiciones de hipoxia, elórgano que se utilizó para elle fue el hígado puesto que de todos los órganos de la economía de un pez, el hígado presenta una importancia superlativa ya que en él se centralizan el tratamiento y distribución del metabolismo y se proporciona a los demás órganos y tejidos una mezcla adecuada de nutrientes a través del torrente sanguí-neo(Fabricio Vigliano,2002). as enzimas que se analizaron fueronla, malato deshidrogena (MDH) y las Piruvato Oxido Reductasas, Lactatico deshidrogenasa (LDH), Alopina deshidrogenasa (ALPDH) y Estrombina deshidrogenasa (STRDH), la enzima MDH participa en la vía metabólica del Ciclo de Krebs, oxidando al malato produciendo Oxalacetato, por otro lado están las PORs que participan en la vía de las opinas, entre ellas la mas destacable la LDH que participa en lareducción del piruvato a lactato en condiciones de bajo oxigeno, (Fabricio Vigliano,2002). Por otro lado se realizó un estudio de la composición del plasma de las truchas, en donde se midieron las concentraciones de glucosa, urea, coleste-rol, fósforo, albumina, calcio y proteínas totales. Estos compuestos son indicadores de estrés en los análisis sanguíneos, por ejemplo la glucosa es uno de losindicado-res de estrés mas utilizados ya que en momentos de estrés el organismo libera mayores cantidades de glucosa al torrente sanguíneo, junto con otras sustancias, para poder mantener el estado de alerta y tener energía inmediata pera cualquier even-tualidad.
Para las mediciones y obtención de datos se utilizaron las técnicas espectrofométri-cas y colorimétricas, la técnicas espectrofo-tométricase utilizó en los análisis enzimá-ticos, que median las concentraciones de NADH en su longitud de onda de absorción, la técnica colorimétrica se utilizó en el análisis sanguíneo en donde se utilizaron derivatizantes que reaccionaban con los componentes sanguíneos que daban una sierta tonalidad del color correspondiente al análisis, y comparando con una patrón reactivo, pudiendo obtener laconcentración de los componentes.


MATERIALES Y METODOS

Manejo de las truchas:
Los individuos de trucha fueron obtenidos de la piscicultura Pangue, ubicada en el Km. 4 camino a Florida, VIII Región, todas las truchas correspondían a la misma cohorte, de 8 meses de edad, las truchas se mantuvieron en una cubeta de agua sin aireación durante 10 minutos, para proceder a analizarlas las truchas fueronanestesiadas con BZ-20, para poder ser manipula-das, luego de que el anestésico surtiera efecto las truchas fueron medidas y pesadas y además se les extrajo una muestra de sangre a cada ejemplar, la extracción se realizó en la arteria caudal y la jeringa fue cebada con heparina, para luego realizar la extracción de los órganos.

Extracción de tejidos.
Primeramente a las truchas se les realizóun corte en la zona ventral, teniendo el cuidado de no dañar ningún órgano, el corte se realizó desde la el punto en que se juntan los opérculos del pez y hasta un poco antes de la cloaca. Con el corte listo ayudado con una pinza gruesa se sujeta firmemente el esófago del pez y este es tirado hasta que se desprenda del cuerpo del animal, con esto se extraen todos los órganos ligados al tractodigestivo, de los cuales se tomaron el hígado y vaso, el hígado fue pesado en todos los ejemplares, también se extrajeron muestras de tejido muscular y de cerebro.

Obtención de plasma
Las muestras de sangre de cada individuo se dejo en tubos Eppendorf en forma individual, los tubos se centrifugaron a 5000 rpm por 3 minutos, con esto se obtiene un pellet y un sobrenadante, el sobrenadante es...